OTUD7A在人胶质瘤中的表达变化及其对人胶质瘤细胞U251功能影响的研究.pdfVIP

OTUD7A在人胶质瘤中的表达变化及其对人胶质瘤细胞U251

功能影响的研究

摘要

胶质瘤是颅内最常见的恶性肿瘤，约占恶性脑肿瘤的80%。目前胶质瘤的

治疗通常采用手术切除、放化疗的治疗方法。但由于血脑屏障限制、肿瘤的弥

漫侵袭性生长、放化疗抵抗等因素，传统治疗方案的预后效果不佳。近年来，

越来越多的分子治疗新靶点被发现，分子病理已引入临床指导胶质瘤的诊断、

预后评估和个性化治疗。

proteintranslationalmodificationsPTMs

泛素化是蛋白质翻译后修饰（，）的

deubiquitinasesDUBs

一种重要类型。这一过程是可逆的，去泛素化酶（，）能

够逆转由泛素激活酶、泛素结合酶、泛素连接酶介导的泛素化修饰。泛素化-去

泛素化的动态平衡共同维持了蛋白质稳态，其异常会导致包括肿瘤在内多种疾

病的发生和发展。至今发现的去泛素化酶家族有100多位成员，根据结构和作

用机制不同分为9个家族，分别为：UCHs家族、OTUs家族、USPs家族、

MCPIPs家族、MJDs家族、PPPDEs家族、JAMMs家族、ZUP1家族和

MINDYs家族。

在胶质瘤中，OTUs家族的去泛素化酶发挥着不同的作用，例如OTUB1和

A20在胶质瘤组织中表达上调且与胶质瘤患者的不良预后有关，是胶质瘤的促

癌因子。OTUD4在胶质母细胞瘤中发挥促癌作用，通过稳定CDK1，激活

MAPK信号通路促进胶质母细胞瘤的进展。而OTUD3和UCH-L5在胶质瘤中

表达下调且与胶质瘤患者的良好预后有关，是胶质瘤的抑癌因子。有研究发现

OTU去泛素化酶7A（OTUdomain-containingprotein7A，OTUD7A）在肝癌和

尤文氏肉瘤中起相反的生物学作用，而其在胶质瘤中的作用，目前尚不清楚。

为了探究OTUD7A在人胶质瘤中的表达，本研究首先利用癌症基因图谱

TCGAGEOCGGA

（）、胶质瘤基因组数据库（）和中国脑胶质瘤图谱（），

分析了OTUD7A对人胶质瘤患者预后的影响及其在不同等级胶质瘤中mRNA

表达水平。为了研究OTUD7A对人胶质瘤细胞U251功能的影响，我们应用

CCK-8、平板克隆、Westernblotting和免疫荧光染色等实验技术，观察了

OTUD7A对胶质瘤U251细胞增殖能力、克隆形成能力以及增殖相关蛋白表达

水平的影响。我们还应用Transwell和Westernblotting实验技术，观察了

OTUD7A对U251细胞迁移能力、侵袭能力以及迁移和侵袭相关蛋白表达水平

的影响。最后，我们应用流式细胞术和Westernblotting实验技术，观察了

OTUD7A对U251细胞凋亡率和凋亡相关蛋白表达水平的影响。实验结果如下：

I

1.通过分析TCGA、CGGA数据库病理样本信息，根据OTUD7AmRNA

表达水平中位数将胶质瘤患者分为OTUD7AmRNA高表达水平组和OTUD7A

mRNA低表达水平组。与OTUD7AmRNA高表达的胶质瘤患者相比，

OTUD7AmRNA低表达的胶质瘤患者总生存期和无病生存期更短，差别具有高

P0.001RembrandtGEO

度统计学意义（）。分析、数据库病理样本信息发现，

与正常脑组织相比，胶质瘤中OTUD7AmRNA表达水平更低，并且随着胶质瘤

级别的增加，恶性程度增加，OTUD7AmRNA的表达水平逐渐降