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食源性疾病主动监测生物样本介绍.ppt

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第30页,共42页,星期日,2025年,2月5日第1页,共42页,星期日,2025年,2月5日主要内容一、概述-为什么做?检什么菌?采什么标本?如何鉴定?如何报送菌株?(网报另讲)二、实验室检测技术-沙门氏菌、志贺氏菌三、实验室检测技术-致泻大肠埃希氏菌四、实验室检测技术-副溶血性弧菌以上菌株鉴定均安排了实验室演示课第2页,共42页,星期日,2025年,2月5日1、疑似食源性异常病例/异常健康事件监测2、食源性疾病主动监测3、食源性疾病(包括食物中毒)报告监测食源性疾病监测内容第3页,共42页,星期日,2025年,2月5日2013年我省食源性疾病监测食源性疾病主动监测2012年8家医院和4家疾控机构2013年11家医院和11家疾控机构第4页,共42页,星期日,2025年,2月5日2013年食源性疾病主动监测单位第5页,共42页,星期日,2025年,2月5日实验室检测(一)目的为食源性疾病诊断提供病原学确证,通过对病原体进行深入的分析,从病原学上提供病因相关性的实际证据,结合流行病学调查,分析污染食品的来源、证实污染食品在暴发流行中的作用。建立我国食源性致病菌分子分型溯源数据库,提高早期发现食源性疾病暴发的能力;同时,对食源性致病菌分离株开展药敏试验,为食源性疾病治疗、预防和控制措施提供指导。第6页,共42页,星期日,2025年,2月5日实验室检测(二)检测项目(检哪几种病菌?)对标本进行可疑食源性致病菌菌株(沙门氏菌、致泻大肠埃希氏菌、志贺氏菌、副溶血性弧菌)实验室检测分离,向“国家食源性疾病主动监测网”报送数据、信息,省疾控审核认可后上报。原则上每家主动监测点医院每周提供不少于10份病历信息和标本,全年提供不少于500份。第7页,共42页,星期日,2025年,2月5日实验室检测(三)标本采集(如何采样?)监测病例为以腹泻症状为主诉(吃了食品引起的)就诊的门诊和住院病例,每日排便3次或3次以上,且粪便性状异常(稀便、水样便、粘液便或脓血便等)。病人排出新鲜粪便于无菌容器内,用2支无菌棉拭子多点采集粪便样本(如有脓血或黏液应挑取脓血、黏液部分,液体粪便应取絮状物,使棉拭子表面蘸满粪便),插入Cary-Blair运送培养基内。第8页,共42页,星期日,2025年,2月5日实验室检测(三)标本收集标本包括新鲜的或转移至Cary-Blair运送培养基的粪便或肛拭子。最优标本是转移至Cary-Blair运送培养基的粪便拭子。肛拭子不是最佳标本,仅在病人无粪便标本时采用。肛拭子收集后应当目测,需要在拭子上明显见到粪便。所采集的标本尽快检验,放入Cary-Blair运送培养基中的标本应在冷藏条件下24h内送检。新鲜的粪便标本置于清洁、干燥、无肥皂或消毒液残留的容器中,冷藏条件下8h内送检。第9页,共42页,星期日,2025年,2月5日粪便样本的保存、运送和检测培养条件mEC:新生霉素增菌肉汤SBG磺胺增菌液MAC麦康凯琼脂平板木糖赖氨酸脱氧胆盐(XLD)改良CCD琼脂基础(mCCD)致病性大肠杆菌(EPEC)肠产毒性大肠杆菌(ETEC)肠侵袭性大肠杆菌(EIEC)肠出血性大肠杆菌(EHEC)肠黏附性大肠杆菌(EAEC)硫代硫酸盐柠檬酸盐胆盐蔗糖琼脂培养基TCBS第10页,共42页,星期日,2025年,2月5日四、检验程序(如何鉴定?)第11页,共42页,星期日,2025年,2月5日五、结果与报告(如何报?)

当检出的可疑菌落生化性状符合致病菌主要生化特征,结合血清学和毒力基因鉴定结果,报告粪便标本中是否检出所规定的致病菌。通过“国家食源性疾病主动监测网”报送数据、信息,省疾控审核认可后上报。第12页,共42页,星期日,2025年,2月5日

六菌株的保存和上送(如何送?)

培养物穿刺接种3%氯化钠半固体培养基,轻拧管盖,36℃±1℃培养24h,盖紧管盖。也可以在动力试验培养基24h培养物上加入一层灭菌矿物油。(副溶弧菌室温贮存培养物,不要冷藏。)

如果需要长期保存菌株,将0.7mL3%氯化钠脑心浸液肉汤6h~12h培养物和0.3mL灭菌甘油加入灭菌菌种管,立即放置-70℃保存。按照方案要求定期上送。第13页,共42页,星期日,2025年,2月5日二、实验室检测技术-沙门氏菌、志贺氏菌第14页,共42页,星期日,2025年,2月5日SBG磺胺增菌液MA

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