研究生课生理学实验技术.pptVIP

专题I：溶液的配制2010年9月2010级硕士研究生课动物生理学实验技术1、实验台准备2、器皿的准备3、药品的准备4、浓度的确定及计算0504020301摩尔浓度1L溶液里含有多少摩尔溶质表示的溶液浓度称为摩尔浓度，M，计算公式：例1：蔗糖的C12H22O11分子量=342，1升水中溶解了171g蔗糖，求蔗糖溶液的摩尔浓度？例2：请配制1mM(1mol/L)蔗糖溶液100mL例3：请配制125mM的NaOH溶液1mL含结晶水的盐溶液摩尔浓度的配制01需配制0.1M的Na2CO3溶液1mL，现有药品为Na2CO3?10H2O，如何配制？需称多少克？答案：2.86×10-2g02（2）当量浓度当量浓度(N，normality)：1升溶液所含溶质的克当量数。过去常用，现只用于部分酸溶液。当量浓度与摩尔浓度的换算：与化合价有关，一当量即得失一个电子盐酸放出一个H+，化合价为1，1NHCl=1MHCl硫酸化合价2,放2质子，1MH2SO4=2NH2SO4常用浓盐酸的浓度为36%，密度1.17891%NaCl：1g，100mL75%乙醇，V/V请用95%乙醇配制75%乙醇100mL做酒精棉球（3）百分比浓度01要配250mL1M的硫酸溶液，市售的浓硫酸为密度1.836g/cm3、浓度98%，问取多少mL这样的浓硫酸?02答案：13.6mL5、称量固体：颗粒药品粉末药品膏状药品易潮解药品腐蚀性药品：强碱液体：挥发性液体强酸有机溶剂自我防护、防污染12配制标准溶液配制步骤：例：配制1升0.01mol/L的KMnO4溶液配制标准溶液的步骤：1．计算所需溶质KMnO4的质量：n=0.01×1=0.01mol质量m=0.01mol×158=1.58克2．称量：称取1.58g固体KMnO43．溶解：在烧杯中用50ml左右的蒸馏水溶解KMnO44．移液：溶液必须冷却后才能转移到容量瓶中。5．洗涤烧杯3次，一并移入容量瓶6．定容7．振荡摇匀，装入试剂瓶，贴上写好的标签（浓度、时间、人）容量瓶：用于配制标准溶液或稀释溶液，有25、50、100、250、500、和1000ml等规格。需注意:1．溶质先在烧杯内全部溶解然后再移入容量瓶。2．不能加热，不能代替试剂瓶用来存放溶液。干粉倾倒入三角瓶时的注意事项普通溶液的配制：量筒：多数生化试剂量杯：生理盐溶液带刻度的烧杯试管：浓度要求不高的洗涤溶液，浸泡载波片的2%盐酸，洗液带刻度的离心管铬酸洗液：1：强洗液重铬酸钾150g，蒸馏水300ml，浓硫酸3000ml2：中等强度洗液浓硫酸50%，蒸馏水50%，重铬酸钾5%3：操作：将重铬酸钾加入蒸馏水中，使之自然溶解或水浴溶解，慢慢加入浓硫酸，边加边搅拌，如发热过剧则冷却后再继续加。操作时要穿橡皮围裙、长统胶靴、戴上眼镜和厚胶皮手套，以保安全。01蒸馏水：一蒸，二蒸，三蒸03自来水：02开水：04去离子水：水的选择PH的调节精密pH试纸：室温，自然光照pH计，用标准溶液定期标定校准01室温024℃NaN3,柳硫汞1/10000320℃50%甘油，5%贮备溶液及其稀释0102030405EDTANa2，只能溶解于pH8.0的水中DNA样品：浓溶液形式溶解于pH8.0以上的碱性水溶液中抗菌问题：0.05-0.1%叠氮钠，0.01%柳硫汞RNA样品：浓溶液形式溶解于pH5.2以下的酸性水溶液中蛋白溶液：浓溶液溶于中性缓冲液PBS中特殊溶液的配制及其注意事项苏木精苏木精是从南美的苏木（热带豆科植物）干枝中用乙醚浸制出来的一种色素，是最常用的染料之一。苏木精不能直接染色，必须暴露在通气的地方，使他变成氧化苏木精（又叫苏木素）后才能使用，这叫做“成熟”。苏木精的“成熟”过程需时较长，配置后时间愈久，染色力愈强。被染材料必须经金属盐作媒剂作用后才有着色力。所以在配制苏木精染剂时都要用媒染剂。常用的媒染剂有硫酸铝按、钾明矾和铁明矾等。苏木精是淡黄色到锈紫色的结晶体，易溶于酒精，微溶于水和甘油，是染细胞核的优良材料，他能把细胞中不同的结构分化出各种不同的颜色。分化时组织所染的颜色因处理的情况而异，用酸性溶液（如盐酸—酒精）分化后呈红色，水洗后仍恢复青蓝色，用碱性溶液（如氨水）分化后呈蓝色，水洗后呈蓝黑色。洋红洋红