无菌检查法中药制剂检测技术精品在线开放课件.pptx

《中药制剂检测技术》精品在线开放课程;一、无菌检查法概述;;1.培养基的种类及制备无菌检查用培养基主要有硫乙醇酸盐流体培养基（用于培养好氧菌、厌氧菌）、胰酪大豆胨液体培养基（真菌、需氧菌培养基）。其制备的处方、方法按《中国药典》规定执行。

2.制备好的培养基应保存在2～25℃、避光的环境。培养基若保存于非密闭容器中，一般在3周内使用；若保存于密闭容器中，一般可在一年内使用。

3.培养基的适用性检查无论是市售的脱水培养基或配制的培养基，其无菌性检查及灵敏度检查应符合药典规定。;常用的稀释液、冲洗液：0.1%蛋白胨水溶液、pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲溶液，其制备方法按《中国药典》规定执行。

稀释液、冲洗液配制后应采用验证合格的灭菌程序灭菌。

根据供试品的特性，可选用其他经验证过的适宜的溶液作为稀释液、冲洗液。

如需要，可在上述稀释液或冲洗液的灭菌前或灭菌后加入表面活性剂或中合剂等。;1．检验数量

检验数量是指一次试验所用供试品最小包装容器的数量。

批出厂产品最少检验数量按表5-8规定；

供试品的最少检验量按表5-9规定。

表中最少检验数量不包括阳性对照试验的供试品用量。一般情况下，供试品无菌检查若采用薄膜滤过法，应增加1/2的最小检验数量作为阳性对照用；若采用直接接种法，应增加供试品无菌检查时每个培养基容器接种的样品量作阳性对照用。;供试品;供试品;2.检验量

指一次试验所用的供试品总量（g或ml）

每份培养基接种的供试品量按表5-8、表5-9规定。

若每支（瓶）供试品的装量按规定足够接种两份培养基，则应分别接种硫乙醇酸盐流体培养基和胰酪大豆胨液体培养基。

采用薄膜滤过法时，检验量应不少于直接接种法的供试品总接种量，只要供试品特性允许，应将所有容器内的全部内容物滤过。;3．阳性对照

应根据供试品特性选择阳性对照菌，选择方法可以见下表。阳性对照试验的菌液制备同方法验证试验，加菌量小于100cfu，供试品用量同无菌检查每份培养基接种的样品量。阳性对照管培养48～72小时应生长良好。;4．阴性对照

供试品无菌检查时，应取相应溶剂和稀释剂，冲洗液同法操作，作为阴性对照。阴性对照不得有菌生长。

无菌试验过程中，若需使用表面活性剂、灭活剂、中和剂等试剂，应证明其有效性，且对微生物无毒性。

中国药典的“无菌检查法”有直接接种法和薄膜滤过法两种。只要供试品性状允许，应采用薄膜过滤法。进行供试品无菌检查时，所采用的检查方法和检验条件应与验证的方法相同。;5．供试品处理及接种培养基：薄膜过滤法和直接接种法。;5．供试品处理及接种培养基：薄膜过滤法和直接接种法;5．供试品处理及接种培养基：薄膜过滤法和直接接种法;直接接种法图示;6．培养及观察;供试品符合规定;当符合下列至少一个条件时，方可判试验结果无效：

（1）无菌检查试验所用的设备及环境的微生物监控结果不符合无菌检查法的要求。

（2）回顾无菌试验过程，发现有可能引起微生物污染的因素。

（3）阴性对照管有菌生长。

（4）供试品管中生长的微生物经鉴定后，确证是因无菌试验中所使用的物品和（或）无菌操作技术不当引起的。

试验若经确认无效，应重试。重试时，重新取同量供试品，依法检查，若无菌生长，判供试品符合规定；若有菌生长，判供试品不符合规定。;THANKYOU.