miR-146a通过调控细胞焦亡参与变应性鼻炎的机制研究.pdfVIP

miR-146a通过调控细胞焦亡参与变应性鼻炎的机制研究

摘要

变应性鼻炎（allergicrhinitis,AR）是气道过敏性炎症的常见疾病之一，全球人口中

发病率约为10％～40％，且有逐渐升高的趋势。目前普遍认为AR的主要发生机制是

由Th2型细胞参与，由IgE介导的Ⅰ型变态反应，最终，由肥大细胞和嗜碱性粒细胞的

脱颗粒释放出多种炎症介质，引发鼻塞、喷嚏、流涕等一系列临床表现，严重影响生活

工作质量。MicroRNA（miRNA）是长度约为20个核苷酸的短链非编码RNA，广泛参

与基因表达的转录后调控，其中miR-146a目前已被证明在变应性疾病中具有抗炎特性。

细胞焦亡（pyroptosis）是一种最近新发现的非典型的程序性细胞死亡方式。目前miR-

146a及细胞焦亡参与AR的发病机制研究尚未完全明确，本研究以Balb/c小鼠及

HNEpC细胞系为主要材料，探究了miR-146a通过调控细胞焦亡在AR发病机制中的

作用。

研究方法：

1.选择Balb/c小鼠进行AR疾病模型构建。前2周，使用每隔一天腹腔内注射卵清

蛋白（OVA）和氢氧化铝的混合物进行基础阶段的致敏，间隔1周后，每日对小鼠进

行OVA滴鼻共1周，造模周期共4周，采用行为学评分联合ELISA检测小鼠血清IgE、

IL-4、IL-5评估模型构建效果，并在miR-146a过表达腺相关病毒滴鼻前后使用ELISA

检测小鼠血清中IgE、IL-4、IL-5、IL-1β、IL-18、GSDMD表达变化。

2.在临床中收集AR患者和正常对照的外周血样本，提取外周血单个核细胞

（PBMCs），并取AR模型小鼠及正常对照小鼠鼻黏膜，分别提取总RNA后，用RT-

qPCR对其中IL-1β、IL-18、GSDMD表达进行检测。

3.使用慢病毒转染的方法构建miR-146a敲低的HNEpC稳转细胞系，使用屋尘螨

主要变应原（Derp1）刺激48h后，应用Westernbolt方法检测细胞焦亡相关因子IL-18、

IL-1β、GSDMD、Caspase-1的表达。

研究结果：

1.AR造模小鼠血清中的IgE、IL-4、IL-5表达水平明显升高，鼻涕、喷嚏、挠鼻

次数明显增加，提示造模成功。

2.AR患者外周血PBMC、AR造模小鼠血清及鼻黏膜中细胞焦亡相关因子IL-1β、

IL-18、GSDMD的表达升高。

3.AR造模小鼠使用miR-146a腺相关病毒滴鼻后，鼻涕、喷嚏、挠鼻明显降低，

血清中IgE、IL-4、IL-5、IL-1β、IL-18、GSDMD表达降低。

4.屋尘螨主要变应原（Derp1）刺激miR-146a敲低的HNEpC细胞系后，细胞焦

I

亡相关因子Caspase-1、IL-18、IL-1β、GSDMD表达升高。

结论：

1.细胞焦亡参与变应性鼻炎的发病机制。

2.miR-146a通过抑制细胞焦亡降低AR炎症反应，改善AR症状。

硕士研究生：王广阔（耳鼻咽喉科学）

指导教师：宋西成教授

关键词：变应性鼻炎；miR-146a；细胞焦亡；AR小鼠模型

II

StudyonthemechanismofmiR-146aparticipatinginallergicrhinitisby

regulatingcellpyroptosis

Abstract

Objective: