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第40讲微生物的培育与应用
[考纲明细]1.微生物的分别和培育2.某种微生物数量的测定3.培育基对微生物的选择作用4.利用微生物发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用
学问自主梳理
一、微生物的试验室培育
1.培育基
(1)概念:人们依据微生物对eq\o(□,\s\up3(01))养分物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的eq\o(□,\s\up3(02))养分基质。
(2)养分成分:水、eq\o(□,\s\up3(03))碳源、eq\o(□,\s\up3(04))氮源、无机盐四类养分物质,另外还须要满意微生物生长对eq\o(□,\s\up3(05))pH、特别养分物质以及eq\o(□,\s\up3(06))氧气的要求。
(3)培育基的分类
①按物理状态分类
②按化学成分分类
③按功能分类
[深化思索]为什么选择培育能够“浓缩”所需的微生物?
提示在选择培育的条件下,可以使那些能够适应这种养分条件的微生物得到快速繁殖,而那些不适应这种养分条件的微生物的繁殖被抑制,因此可以起到“浓缩”的作用。
2.无菌技术
(1)含义:指在培育微生物的操作中,全部防止eq\o(□,\s\up3(17))杂菌污染的方法。
(2)关键:防止eq\o(□,\s\up3(18))外来杂菌的入侵。
(3)不同对象的无菌操作方法(连线)
答案①、②、⑥—b—Ⅰ、Ⅱ③、④、⑤—a—Ⅲ、Ⅳ
3.大肠杆菌的纯化培育
(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培育基
①操作步骤
eq\x(计算)→eq\x(\o(□,\s\up3(19))称量)→eq\x(溶化)→eq\x(\o(□,\s\up3(20))灭菌)→eq\x(\o(□,\s\up3(21))倒平板)
②倒平板的方法及留意事项
a.请用文字和箭头写出正确的倒平板操作流程:eq\o(□,\s\up3(22))丙→乙→甲→丁。
b.乙中的灭菌方法是eq\o(□,\s\up3(23))灼烧灭菌。
c.丁中的操作须要等待eq\o(□,\s\up3(24))平板冷却凝固才能进行。
[深化思索](1)倒平板操作为什么须要使锥形瓶的瓶口通过火焰?
提示通过灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培育基。
(2)平板冷凝后,为什么要将平板倒置?
提示平板冷凝后,皿盖上会凝聚水珠,凝固后的培育基表面的湿度也比较高,将平板倒置,既可以使培育基表面的水分更好地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培育基,造成污染。
(2)纯化大肠杆菌的两种方法
1)平板划线法
①概念:是通过eq\o(□,\s\up3(25))接种环在琼脂固体培育基表面eq\o(□,\s\up3(26))连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培育基的表面。
②留意事项:
a.
b.灼烧接种环,待其冷却后才能伸入菌液,以免温度太高杀死菌种。
c.其次次及其以后的划线操作总是从上一次划线末端起先,能使细菌的数目随着划线次数的增加而渐渐削减,最终得到由单个细菌繁殖而来的菌落。
d.划线时最终一区不要与第一区相连。
e.划线用力大小要适当,防止用力过大将培育基划破。
2)eq\o(□,\s\up3(27))稀释涂布平板法
①概念:是将菌液进行一系列的eq\o(□,\s\up3(28))梯度稀释,然后将eq\o(□,\s\up3(29))不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培育基的表面,进行培育。
②操作过程
(3)菌种的保存方法
①对于频繁运用的菌种,可以采纳eq\o(□,\s\up3(30))临时保藏的方法。
②对于须要长期保存的菌种,可以采纳eq\o(□,\s\up3(31))甘油管藏的方法。
二、土壤中分解尿素的细菌的分别与计数
1.筛选菌株
(1)自然界中目的菌株筛选的依据:依据它对eq\o(□,\s\up3(01))生存环境的要求,到相应的环境中去找寻。
(2)试验室中微生物筛选的原理:人为供应有利于eq\o(□,\s\up3(02))目的菌株生长的条件(包括养分、温度、pH等),同时eq\o(□,\s\up3(03))抑制或阻挡其他微生物生长。
(3)选择培育基:允许特定种类的微生物生长,同时eq\o(□,\s\up3(04))抑制或eq\o(□,\s\up3(05))阻挡其他种类微生物生长的培育基。
2.统计菌落数目
(1)常用方法:eq\o(□,\s\up3(06))稀释涂布平板法。
(2)统计依据
当样品的eq\o(□,\s\up3(07))稀释度足够高时,培育基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个eq\o(□,\s\up3(08))活菌。通过统计平板上的菌落数,就能推想出样品中大约含有多少活菌。
(3)活菌计算方法:每克样品中的菌株数=(C÷V
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