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第4课动物细胞工程
核心概念•自查.务实必彳知识
【课标要求】
动物细胞工程包括细胞培养、核移植、细胞融合和干细胞的应用等
技术
【概梳理】
一、动物细胞培养
1.概念脂从动物体中取出相关的组织将它分散成里金细胞,然后在适
宜的培养条件下,让这些细胞生长和增殖的技术。
2.原理:细胞增殖。
3.培养条件:
⑴营养:细胞在体外培养时,培养基中应含有细胞所需要的各种营养
物质。使用合成培养基时还需加入血清等一些天然成分。
(2)无菌、无毒的环境:
培养液和培养用具进行灭菌处理
<在无菌环境下进行操作
定期更换培养液,以便清除代谢物
⑶温度、pH和渗透压:36.5±0.5℃;适宜的pH:二。
(4)气体环境:
I95%的空气:其中为细胞代设必需
i5%的CO?:以便维持培养液的pH
4.培养过程:
取动物组织块
物理法:期至
Y化学法:用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理
配制细胞悬液
原代培养:具有贴壁生长和接触抑制的特点
(1)做法:用基叁亘邈处理后分瓶培养
传代।1吐50代左右时增殖缓慢,甚至停止
培养(2)特点部分细胞核型可.能发生改变.可.无限
II增殖
5.干细胞:
⑴干细胞来源:早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官。
⑵分类:胚胎干细胞和成体干细胞。
二、动物细胞融合技术与单克隆抗体
1.动物细胞融合技术:
⑴概:使两个或多个动物细胞结合形成二企细胞的技术。
(2)原理:细胞的流动性。
(3)融合方法:PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等。
(4)意义:突破了有避交的局限,使远缘杂交成为可能也为制造里克
隆抗体开辟了新途径。
2.单克隆抗体:
⑴制备过程:
射特定的
抗原蛋白
骨髓瘤B淋巴细胞
细胞◎杂交细胞——第1次筛选:
T筛选出杂交病细胞
牛)杂交瘤细胞
•・••筛选——第2次筛选:
(~K筛选出能分泌所需抗体
的杂交瘤细胞
体外培养/\射到小鼠腹腔内
从细.庖培噫:从小鼠腹水中提取
养液中提泊~-1下/单克隆抗体
⑵用途:体外诊断试剂;治疗疾病。
三、动物体细胞核移植技术和克隆动物
1.概:动物细胞核移植技术是将动物一个细胞的细胞核移入去睡
卵地胞中,并使重组细胞发育成新胚胎,继而发育成动物个体的技
术。分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植。
2.体细胞核移植过程:
供体一.细胞培养.供体细胞
体细胞、、细胞壬加虹
卵巢卵Mil期,去核去核卵
母细胞iJ,母细胞
茎邕胚胎金望一代孕母体
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