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血痕檢驗
血液在人體外乾燥以後所形成的斑跡叫做血痕。血痕特點:1分布广泛,是最常見的法醫物證,占總量90%,具有重要的法醫學意義推測案件的性質----自殺、他殺、災害推測死亡的原因----是否失血引起的死亡認定犯罪嫌疑人----遺傳標記的檢測2易受影响,發生降解、腐敗。紅細胞被破壞、血清乾燥無法分離-----常规ABO血型檢測方法的不適用大分子的蛋白質抗原和DNA被破壞----及时发现和提取,及时检验。檢驗目的1亲子鉴定----是通过对人类遗传标记的检测,根据遗传规律分析,对有争议的父母与子女血缘关系的鉴定2个人识别----确定某个人是谁、某人与另一个人是否同一人、生物性检材是否源于某个体的鉴定檢驗程式由于生物性检材的主要特点在于环境条件的作用使它具有某些不确定性,因此。法医物证检验一般是通过由简单到复杂、逐步排除、逐步缩小范围的实验分析策略实现个人识别的一、血痕的肉眼檢查血痕的現場勘查主要是觀察血痕存在的部位,顏色、形狀、範圍和分佈特徵部位:室內----注意把手、水龍頭、毛巾、磚縫兇器----刀柄的縫隙人体----指甲缝、衣服皱褶、袖口、扣孔、鞋边顏色:一般呈暗紅色,有光澤。隨後逐漸變成暗色、褐色或灰褐色根据血痕的干燥程度和颜色,大致推测血痕經過的時間形狀:滴落高度0.1m以內高度滴落0.5m高度滴落1m高度滴落行走方向出血部位範圍:二、血痕的種類鑒別【預備試驗】原理:通過測定血痕中的血紅蛋白及其衍生物的過氧化物酶活性,達到篩查血痕特點:靈敏度高、操作簡便、快速,特異性差方法:聯苯胺試驗【確證試驗】原理:主要根據檢材中是否含有血紅蛋白或其衍生物確定是否是血痕特點:特異性好,靈敏度差三、血痕的種屬鑒定動物血中或某些細菌含有某些與人類血液遺傳標記類似的物質ABO靈長類動物(猩猩、長臂猿)有A、B类似的血型物质低等动物(狗、猪、样、兔)有AB血型物質微生物(肺炎双球菌14型---A、大肠杆菌O86----B)Rh低等靈長類動物(獼猴、廣鼻猴)有Rh抗原物質MN靈長類動物DNA相似的DNA片斷血清學方法-----原抗體體外反應反应特点:(1)特异性:抗原分子上的抗原决定簇和抗体分子超变区相互适應所決定(2)可逆性:表面非共价键结合,在一定条件下可解离,解离后性質不變(3)比例性:抗原抗体结合是否出现可见的反应现象,与两者比例密切相關影響因素:條件溫度:一般在37度-----冷鹽水洗滌,56度解离---实验原理電解質:最適0.85%鹽水,中和分子表面電荷,使由親水—疏水酸鹼度:最適Ph6~8,等電點發生凝集抗原質的變化:蛋白變性分解(生物因素、化學因素、物理因素)量的變化:抗原量的減少抗體特異性:刺激機體產生特定的免疫應答,並與其產物產生特異結合效价:出现明显抗原抗体反应的抗血清最高稀释倍数的倒数【沉淀反应】1實驗原理可溶性抗原與相應抗體在适当电解质存在條件下發生特異性結合,當抗原抗體比例適合時,可形成肉眼可見的抗原抗體複合物沉澱。2实验准备抗血清种类选择:抗人血清蛋白血清--只有种属特异性,而无器官特异性抗人血紅蛋白血清--既有种属特异性,也有器官特异性種屬特異性:指抗體只對某一物種成分發生特異反應的特性。器官特異性:指抗體只對某一器官成分發生特異反應的特性。
品質鑒定:合格標準:特異性好、效價高、外觀清澈透明【免疫層析】——免疫膠體金試驗原理:將各種反應試劑以條帶狀固定在同一試紙條上,待檢標本加在試紙條的一端,通過毛細作用在層析條上滲濾、移行並與膜上吸附有抗人血紅蛋白抗體的免疫膠體金顆粒結合後,樣品中的待測物同層析材料上針對待測物的受體(如抗原或抗體)發生特異性免疫反應。層析過程中免疫複合物被截留、聚集在層析
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