学习情境三放线菌发酵制药.pptVIP

种子培养条件温度通气搅拌消泡Q1Q2Q3Q4任务三发酵生产LOGOLOGOLOGOEdityourcompanysloganLOGOEdityourcompanyslogan学习情境三

放线菌发酵制药发酵制药子学习情境3.3

链霉素发酵任务一发酵准备一、发酵罐的清洗发酵罐的清洗从接种孔加入70L左右的清水，启动搅拌，转速为100r/min左右，用蒸汽加热清水至121℃左右，搅拌30min左右，以此清洗发酵罐。清洗完毕，利用空气压力排出洗水，并用空气吹干发酵罐。检查项目：管路连接阀门密闭性仪表校正二、发酵设备检查三、发酵设备灭菌发酵罐灭菌（空消）灭菌压力：0.147—0.18MPa，45—60min。注意事项：空消后，先用无菌空气保压，灭菌的培养基、相关物料输入罐内后，打开冷却系统进行冷却。附属设备的灭菌分空气过滤器：发酵罐灭菌之前灭菌，灭菌后空气吹干备用。补料系统：补料管路：与补料罐同时灭菌，保温时间1小时。消沫剂系统：蒸汽压力0.15MPa，保温30分钟。消沫剂管路：与补料罐同时灭菌，保温时间1小时。移种管路：蒸汽压力0.30—0.45MPa，保温时间1小时。任务二种子制备1、孢子培养基葡萄糖蛋白胨豌豆浸汁一、培养基配制黄豆饼粉葡萄糖(NH4)2SO4CaCO3种子培养基黄豆饼粉葡萄糖玉米浆CaCO3磷酸盐(NH4)2SO4发酵培养基二、培养基灭菌典型的分批发酵工艺流程图分批灭菌的注意事项各路蒸汽进口要畅通，防止短路逆流；罐内液体翻动要剧烈，以使罐内物料达到均一的灭菌温度。排气量不宜过大，以节约蒸汽。灭菌将要结束时，应立即引入无菌空气以保持罐压，然后开夹套或蛇管冷却，以避免罐压迅速下降产生负压而吸入外界空气，或引起发酵罐破坏。在引入无菌空气前，罐内压力必须低于过滤器压力，否则培养基将倒流入过滤器。连续灭菌流程三、孢子制备1、接种无菌条件，接种斜面。接种操作程序见下图。注意：整个实验操作过程都要非常小心，不要碰翻酒精灯，以免烧伤。（1）用左手大姆指、食指和无名指夹住菌种试管和待接种和斜面试管，右手拧松棉塞、不取下。（2）右手拿接种环，在火焰上烧灼灭菌，特别是箍处。（3）火焰边取下两个棉塞，不能放下；烧灼管口一周。（4）将接种环伸入试管内，冷却后，轻轻挑取少量菌体，立即将接种环抽出。（6）抽出接种环后，烧管口，塞棉塞，接种环灭菌。（5）火焰旁将沾有菌种的接种环迅速伸到斜面培养基的底部，由里向外画蛇形细线，线要画得细些。单击此处添加正文。培养单击此处添加正文。将接种后的试管27℃培养6d～7d。放入恒温箱内，”四、种子培养种子扩大培养流程图1、2-保藏种子3-斜面4-摇瓶5-茄子瓶6-固体培养7、8-种子罐9-发酵罐实验室种子培养的方法：液体培养法（三角瓶摇床振荡或转式培养）；液体深层培养：目前几乎所有的好气发酵均采用此法生产车间种子培养的方法LOGOLOGOLOGOEdityourcompanysloganLOGOEdityourcompanyslogan