共递送双DNA损伤修复抑制剂以增强胰腺癌对不可逆电穿孔治疗响应的机制研究.pdf

华中科技大学硕士学位论文

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摘要

背景：不可逆电穿孔（IrreversibleElectroporation,IRE）消融术是一种治疗局部进展

期胰腺癌的新方法，通过在瘤内释放高压电脉冲、永久性破坏细胞膜以杀伤癌细胞。

但肿瘤异质性导致瘤内存在电脉冲强度较低的区域。该区域中的癌细胞仅经受了可

逆电穿孔（ReversibleElectroporation,RE），在IRE术后仍然存活，是肿瘤复发的重

要危险因素。RE可以诱导癌细胞发生DNA损伤，为联用DNA损伤修复（DNA

DamageRepair,DDR）抑制剂提供了理论可行性。小分子抑制剂奥拉帕利（Olaparib,

OLAP）与AZD0156作用于DDR通路的不同靶点，联用形成合成致死效应。利用纳

米药物递送系统共递送OLAP和AZD0156，可有效增强药物的生物利用度和肿瘤靶

向性，并在控制药物施用比例的同时减少副作用。

目的：阐明共递送OLAP和AZD0156对IRE治疗胰腺癌功效的影响和相关机制。

方法：（1）通过免疫印迹、免疫荧光和平板集落实验阐明RE造成的细胞DNA损伤，

明确OLAP和/或AZD0156与RE的协同效应。（2）制备活性氧敏感的装载OLAP与

AZD0156的肿瘤穿透型高分子胶束（M-TK-OA）。（3）构建Panc02小鼠胰腺癌肿瘤

模型，监测肿瘤生长和小鼠生存情况以探究IRE+M-TK-OA的疗效；并用流式细胞

术分析免疫微环境的改变。（4）建立干扰素基因刺激因子（StimulatorofInterferon

Genes,STING）敲降的胰腺癌模型，探究STING通路对IRE+M-TK-OA疗效的影响。

结果：（1）低强度电脉冲损伤细胞DNA并激活DDR通路。（2）联用AZD0156能抑

制OLAP造成的DDR通路的代偿性上调，导致合成致死。（3）M-TK-OA具有良好

的肿瘤靶向性和生物安全性，显著抑制细胞DNA损伤修复，增强体内外RE的杀伤

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作用。（4）IRE联用M-TK-OA显著改善了胰腺癌小鼠模型的预后，促进CD8T细

胞介导的抗肿瘤免疫和免疫记忆效应。其疗效部分依赖于STING信号通路。

结论：M-TK-OA纳米药物递送系统可以显著增强IRE对胰腺癌的疗效。

关键词：不可逆电穿孔；DNA损伤；纳米胶束；合成致死；奥拉帕利；AZD0156

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本文的研究工作得到湖北省自然科学基金（No.2021CFA052）和国家自然科学基金（No，No）项目的资助。

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目录

目录I

中英文缩写对照表III

摘要VI

AbstractVII

1引言1

1.1胰腺癌的不可逆电穿孔治疗1

1.2DNA损伤修复3

1.3纳米药物递送策略5