中药制剂高效液相色谱法—高效液相色谱法的原理与仪器构成.pptx

中药制剂含量测定技术——高效液相色谱法的原理和仪器构造

案例导入固本咳喘片中补骨脂素和异补骨脂素的含量测定本品是由党参、白术（麸炒）、茯苓、麦冬、盐补骨脂、炙甘草、醋五味子加工而成的片剂采用高效液相色谱法进行含量测定，本品中含补骨脂的量以补骨脂素和盐补骨脂素的含量计算含量测定使用的仪器是高效液相色谱仪，使用前先要进行色谱条件与系统适用性试验，随后还要用配制好的流动相对高压输液泵及其管路进行排气、平衡等操作，将供试品和对照品依次进样，在色谱柱上进行分离，设置检测器参数，由检测器对色谱行为进行分析并在色谱工作站中呈现出来

高效液相色谱法如何进行中药制剂中活性成分的测定?案例导入固本咳喘片中补骨脂素和异补骨脂素的含量测定高效液相色谱仪由哪些部分组成？高压输液泵、进样器、色谱柱和检测器等分别发挥了什么作用？

中药制剂含量测定技术——高效液相色谱法一、概述高效液相色谱法（HPLC）是一种现代色谱分析法，其基本方法是采用高压输液泵将流动相泵入到装有填充剂的色谱柱中，注入的供试品被流动相带入色谱柱内进行分离后，各组分先后进入检测器中检测，最后由数据分析处理系统对各数据进行记录和处理，从而完成定性和定量分析工作

随着科学技术的发展，为高效液相色谱法控制中药及中药制剂的质量提供了更广阔的前景，高效液相色谱法现已成为中药及中药制剂含量测定最常用的分析方法方法类型含量测定方法品种数仪器分析法高效液相色谱法1388气相色谱法58薄层色谱法46紫外-可见分光光度法19化学分析法滴定分析、挥发油测定法等52中药制剂含量测定技术——高效液相色谱法

高效液相色谱法用于含量测定有外标法、内标法、加校正因子的主成分自身对照法、不加校正因子的主成分自身对照法和面积归一化法中药制剂含量测定技术——高效液相色谱法《中国药典》一部收载的中药制剂的含量测定绝大多数采用的是高效液相色谱法中的外标法和内标法，其中外标法最为常用含量测定方法中药活性成分代表中药制剂高效液相色谱外标法黄芩苷柴黄片、防风通圣丸、健儿消食口服液等大黄素和大黄酚黄连上清丸、复方大青叶合剂、冰黄肤乐软膏等绿原酸金嗓开音丸、小儿咽扁颗粒、银翘解毒颗粒等丹皮酚六味地黄丸、桂枝茯苓胶囊、杞菊地黄丸等

二、仪器组成与工作原理1.仪器组成高效液相色谱仪一般由高压输液系统、进样系统、色谱系统、检测系统和数据分析处理系统共同组成。所用仪器应定期检定并符合规定中药制剂含量测定技术——高效液相色谱法

2.仪器构造与功能中药制剂含量测定技术——高效液相色谱法（1）高压输液系统由储液瓶、过滤装置、脱气装置、高压输液泵、梯度洗脱装置等组成储液瓶由化学惰性、耐腐蚀材料制成，有无色和棕色两种。位置一般高于高压输液泵，在使用过程应密闭流动相进入色谱柱前，先经过过滤器，微孔滤膜将直径大于0.45μm的固体颗粒杂质拦截

中药制剂含量测定技术——高效液相色谱法高压输液泵是高效液相色谱仪的关键部件之一，用以完成流动相的输送任务柱塞往复泵：输送流动相高压输液泵耐腐蚀、耐高压、无脉冲、输出流量范围宽，流速恒定，泵体易于清洗和维修高压输液泵可分为恒压泵和恒流泵两类，常使用恒流泵，即压力随系统阻力改变而流量不变。泵性能的好坏直接影响到系统的质量和分析结果的可靠性

中药制剂含量测定技术——高效液相色谱法（2）进样系统进样系统的作用是将试样引入色谱柱，要求进样系统具有使用方便、重复性好、进样量可变范围大、不影响柱分离效能等特点常用进样器有高压进样阀、六通进样阀以及自动进样器等装置

中药制剂含量测定技术——高效液相色谱法（3）色谱分离系统由保护柱、色谱柱、恒温装置和连接阀组成保护柱是装在进样器与色谱柱之间的消耗性柱，具有防止供试品和进样阀垫圈中的固体颗粒进入分析柱的作用。保护柱的填料与分析柱的填充剂相同，柱长为5cm左右，在分析50~100个供试品后需要更换保护柱芯

中药制剂含量测定技术——高效液相色谱法色谱柱是高效液相色谱仪的重要部件，由柱管、接头和过滤片组成品牌填料C18/C8（直径×长度，粒径）如：AgilentZorbaxSB-C18(4.6×250mm,5μm)柱规格：一般采用直形柱管，标准填充柱柱管内径为1.6mm或3.9mm，长10cm~50cm，填料粒度5~10μm中药制剂的定量分析中多使用十八烷基硅烷键合硅胶（ODS）为填充剂的色谱柱、极性溶剂为流动相的反相色谱系统柱填料：基本材料多为粒度5~10μm或3~5μm的全多孔球形或无定型硅胶