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第30页,共49页,星期日,2025年,2月5日第31页,共49页,星期日,2025年,2月5日第32页,共49页,星期日,2025年,2月5日第33页,共49页,星期日,2025年,2月5日第34页,共49页,星期日,2025年,2月5日三、耐药表型的检验1、肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌、大肠埃希菌和奇异变形杆菌中ESBLs检测的筛选与确证试验纸片法:初筛和确证液体稀释法:初筛和确证第35页,共49页,星期日,2025年,2月5日关于细菌药敏试验及耐药机制研究进展第1页,共49页,星期日,2025年,2月5日一、药敏试验种类1、纸片扩散法2、稀释法稀释法包括宏量肉汤稀释法(macrodilutiontest)、微量肉汤稀释法(microdilutiontest)、琼脂稀释法(agardilutiontest)。3、E-test法第2页,共49页,星期日,2025年,2月5日第3页,共49页,星期日,2025年,2月5日细菌药敏试验-宏量稀释法Minimalinhibitoryconcentration(MIC)Referencemethod.Addstandardinoculumtodilutionsofantibiotic.Incubateovernight.MICislowestconcentrationthatinhibitsgrowth(canalsobeperformedbyagardilution).Interpretation(SorR)isbasedonachievabledruglevels104cfu4210.50.250.120mg/ml第4页,共49页,星期日,2025年,2月5日微量液体稀释法第5页,共49页,星期日,2025年,2月5日细菌药敏试验-E-test法E-testStripscontainingagradientofantibioticareplacedonlawnofbacteriaandincubatedovernight.MICisdeterminedatpointwherezoneofinhibitionintersectsscaleonstrip.CombineseaseofKBwithanMICmethod.ParticularlyusefulforS.pneumoniae.第6页,共49页,星期日,2025年,2月5日二、药敏试验基本条件第7页,共49页,星期日,2025年,2月5日(1)对于从粪便中分离的沙门菌和志贺菌属,常规仅测试和报告氨苄西林,一种喹酮类药和甲氧苄啶/磺胺甲噁唑。此外对于胃肠外分离的沙门菌属还一定要测试并报告氯霉素及其某一种Ⅲ代头孢菌素的结果。(2)所有确认产ESBLs的菌株应当报告为耐所有青霉素类,头孢菌素类和氨曲南。(3)出于对流行性,治疗及感染控制方面的考虑,应该把从尿中分离的所有菌株做ESBLs筛选试验作为一个基本制度。(4)仅当被认为与临床有关时(如菌血症)才进行奇异变形杆菌ESBLs筛选试验(5)肠杆菌属、枸橼酸杆菌属和沙雷菌属可发展为耐药。最初分离的敏感菌株在开始治疗3~4天内可变为耐药,因此对重复分离菌株应重新进行药敏试验。。第8页,共49页,星期日,2025年,2月5日用纸片扩散法能可靠地测定分离于囊性纤维化病人的铜绿假单菌的敏感性,但在作为敏感结果报告前,应将孵育时间延长至24小时。第9页,共49页,星期日,2025年,2月5日第10页,共49页,星期日,2025年,2月5日第11页,共49页,星期日,2025年,2月5日第12页,共49页,星期日,2025年,2月5日第13页,共49页,星期日,2025年,2月5日第14页,共49页,星期日,2025年,2月5日第15页,共49页,星期日,2025年,2月5日第16页,共49页,星期日,2025年,2月5日第17页,共49页,星期日,2025年,2月5日第18页,共49页,星期日,2025年,2月5日(1)对于肠球菌属,头孢菌素,氨基糖苷类(筛选高水平耐药除外),克林霉素和甲氧苄啶-磺胺甲噁唑可以在体外显示活性但临床上无效,因此这些菌株不应该报告为敏感。(2)肠球菌心内膜炎要求大剂量青霉素或氨苄西林,或万古霉素或替考拉宁联合庆大霉素或链霉素以增加杀菌作用。第19页,共49页,星期日,2025年,2月5日(3)庆大霉素和链霉素筛选试验,能够预测氨苄西林、青霉素或万古霉
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