一种利用污水污泥发酵生产生物农药苏云金杆菌的方法.docx

(19)中华人民共和国国家知识产权局

(12)发明专利说明书

(10)申请公布号CN1772879A

(43)申请公布日2006.05.17

(21)申请号CN200510094429.2

(22)申请日2005.09.19

(71)申请人南京农业大学

地址210095江苏省南京市卫岗1号南京农业大学科技处钱宝英

(72)发明人周立祥王世梅

(74)专利代理机构

代理人

(51)Int.CI

C12N1/20

A01N63/02

权利要求说明书说明书幅图

(54)发明名称

一种利用污水污泥发酵生产生物农药苏云金杆菌的方法

(57)摘要

本发明是一种利用城市生活污泥发酵生产生物农药苏云金杆菌的方法，是一项利用废弃物生产高效生物农药的技术。用含固率为1.5％～5％的污水污泥作为发酵苏云金杆菌Bacillusthringiensis(B.t)的原料。将污泥装入发酵罐中，pH调节至7.2，经121℃，20min灭菌后，按1％～4％(w/w)的比例接入B.t液体种子，于28℃，200r/m条件下，好气发酵30h后放罐。B.t细胞总数达10

法律状态

法律状态公告日

法律状态信息

法律状态

权利要求说明书

1、一种利用污水污泥发酵生产生物农药苏云金杆菌的方法。其特征在于,包括如下步骤:

(1)苏云金杆菌Bacillusthringiensis(B.t)种子扩大培养:从斜面上取一环B.t的菌苔,接种到100mL灭菌的细菌液体培养基(g/L)中(牛肉膏5,蛋白胨10,NaCl5,pH=7.2),置28°C,转速180r/m的摇床上培养12h,做液体种子。

(2)以污水污泥为原料发酵生产B.t:用含固率1.5%~5%的城市生活污泥作原料,发酵罐的装料系数为70%,调节pH=7.2,121°C,20min灭菌后,按1%~4%(w/w)的比例接入苏云金杆菌液体种子,发酵条件:温度28°C,转速200r/m,好气发酵30h后放罐(此时活菌数达109个/mL,其中芽孢占90%以上)。

2、根据权利要求1所述的用污水污泥发酵生产生物农药苏云金杆菌的方法,其特征在于权利要求1中所述的污水污泥是指城市市政污水处理厂或工矿企业内部污水处理厂(站)经过污水二级生化处理工艺后的剩余污泥,包括经过消化的和未消化的,含固率为1.5%~5%的污泥。

3、根据权利要求1所述的用污水污泥发酵生产生物农药苏云金杆菌的方法,其特征在于苏云金杆菌Bacillusthringiensis(B.t)种子扩大培养采用细菌液体培养基培养,配方为(g/L)牛肉膏5,蛋白胨10,NaCl5,pH=7.2。

4、根据权利要求1所述的用污水污泥发酵生产生物农药苏云金杆菌的方法,其特征在于用发酵罐发酵生产B.t是指用含固率1.5%~5%的污水污泥(pH=7.2)作原料,在通用式发酵罐中发酵生产B.t菌液,污水污泥经灭菌后,按1%~4%(w/w)接入苏云金杆菌液体种子,28°C,搅拌转速200r/m,通气发酵30h放罐。

5、根据权利要求1所述的用污水污泥发酵生产生物农药苏云金杆菌的方法,其特征在于调节细菌培养基和污水污泥pH到7.2是指采用稀酸(HCl或H2SO4)或稀碱(NaOH)调节。

说明书

p一、技术领域

本发明涉及一种用污水污泥发酵生产生物农药苏云金杆菌的方法,是一项利用废弃物生产高效生物农药的技术,属于环境生物技术领域。

二、技术背景

我国多数污水处理厂采用活性污泥法进行污水净化,在净化污水的同时会产生占污水进水量约0.3-0.7%的污水污泥。这些数量日益庞大而且高度集中的废弃物的无合适的处置出路,已成为严重困扰着我国污水处理事业的健康发展的重要因素之一。

另一方面,目前使用化学农药防治植物病虫害对农业增产起到重要的作用,但是化学农药的残留对环境和人畜健康都有很大危害。大力发展对人畜无害的生物农药是现代农业特别是有机农业和无公害农业的迫切要求。苏云金杆菌是迄今世界上应用最为广泛也最为成功的生物农药,苏云金杆菌在发育过程中其细胞的一端会形成折光而不易着色的椭圆形芽孢,同时在细胞的另一端形成菱形或近正方形的伴孢晶,随后芽孢和伴孢晶体从细胞中脱落进入发酵介质中。伴孢晶体是一种蛋白质毒素(又称δ-内毒素),对鳞翅目、双翅目、鞘翅目、直翅目等昆虫有显著的杀虫毒性,用于防治粮食作物、蔬菜、棉花、果树