实验6-胰岛素和肾上腺素对家兔血糖浓度的影响.pptVIP

实验2324胰岛素和肾上腺素对家兔血糖浓度的影响掌握血糖(bloodsugar)的测定方法及01激素(hormone)对血糖浓度的影响。02了解血糖测定的临床意义。03实验目的与要求实验原理机体的血糖水平受多种激素的调节而维持稳定影响血糖的激素分为两类：降低血糖的激素：胰岛素(insulin)升高血糖的激素：肾上腺素(adrenaline)、胰升糖素、糖皮质激素和生长激素血浆(plasma)：全血经抗凝处理后得到的液体成分，含有凝血因子、纤维蛋白原等血清(serum)：全血凝固后析出的液体，不含纤维蛋白原血样邻甲苯胺法测定血糖浓度620nm测定待测血样的吸光度(A)与同样处理的葡萄糖标准溶液比较(标准管法)即可求得血样中葡萄糖的含量。酸性、加热-3H2O羟甲基糠醛邻甲苯胺醛亚胺（蓝色）葡萄糖(glucose)血样的采集心脏内取血5ml，加入抗凝剂（草酸钠）【胰-1、肾-1】皮下注射胰岛素0.5ml/kg（2U/kg），1小时后1%肾上腺素0.4ml/kg，半小时后心脏内取血5ml，加入抗凝剂【胰-2、肾-2】动物的准备家兔两只，禁食一晚。标记后，测量体重并记录。实验步骤邻甲苯胺法测定血糖浓度取大试管，按Page78表格添加试剂混匀各管，沸水浴中加热10min后取出，流水冷却。用空白管校正吸光度零点，读取各管620nm的吸光度。血浆的制备血样采集后，2000rpm离心5min，取上清。数据空白对照注射激素前注射激素后胰岛素组胰-1胰-2肾上腺组肾-1肾-2G胰-1＞G胰-2G肾-1＜G肾-2A测定：m胰-1、m胰-2、m肾-1、m肾-2实验结果123654V测定×180g/molA标准血糖浓度=—————————×1000A测定———×m标准邻甲苯胺试剂中含冰乙酸，谨防腐蚀分光光度计分光光度计的使用方法微量移液器的使用离心机使用前必须配平：质量配平位置配平电磁炉使用前10min打开；绝对不可干煮；加热完成后，用夹子取出试管，绝对不可用手拿兔子的抓取、固定、心脏采血、皮下注射方法注意事项分光光度计的使用1、打开电源，调节旋钮至需要的波长，预热20~30min2、1档（空白管），T模式下调100%，显示“Blank”、“100”3、拉杆拉至1.5档，T模式下调0%，显示“0.00”4、换到A模式，拉至2、3、4档，读取各个样品的吸光度拉杆，0-4档样品池读数波长毛面光面1、分清光面、毛面。手应接触毛面，光线从光面通过2、用溶液润洗2-3次，装至2/3至4/5体积3、粗纸吸水、柔纸擦亮光面比色杯