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实验二
细菌基本形态和特殊结构观察一目的要求了解普通光学显微镜原理及构造。学习并掌握普通光学显微镜油镜的正确使用方法。★用油镜观察细菌基本形态。了解负染色原理、细菌芽孢染色基本原理,油镜观察细菌的荚膜、芽孢形态。细菌运动性观察。二基本原理1普通光学显微镜的结构2普通光学显微镜的光学成象原理3荚膜染色4芽孢染色1普通光学显微镜的结构(2)光学系统包括反光镜、聚光器、物镜、目镜等。(1)机械系统包括镜座、镜臂、载物台、物镜转换器、镜筒及调节器等普通光学显微镜的光学成象原理添加标题显微镜的放大倍数放大倍数:目镜的放大倍数与物镜的放大倍数之乘积。添加标题目镜:物镜添加标题低倍镜:10X高被镜:40X油镜:100X添加标题X100X添加标题目镜添加标题物镜添加标题logo显微镜的分辨率原因:油镜分辨率高于低倍镜、高倍镜油镜汇聚光线的能力大于低倍镜、高倍镜油镜比低倍镜、高倍镜观察物体更清晰。分辨率是指显微镜能够分辨的最小距离即鉴别限度(R)R=λ∕(2NA)(λ为入射光波波长;NA为显微镜数值孔径)NA=η.sinθη为标本、物镜之间介质的折射率。θ为光轴上物点发出的光线与物镜有效直径两端最大夹角角度的一半。η低倍镜=η高倍镜=η空气=1.0,η油镜η香柏油=1.52θ低倍镜θ高倍镜θ油镜,sinθ低倍镜sinθ高倍镜sinθ油镜NA低倍镜NA高倍镜NA油镜所以,油镜的分辨力比高倍镜、低倍镜高。汇聚光线的能力油镜高于低倍镜、高倍镜。荚膜染色主要成分多为糖类,无色透明且不易着色常用负染色观察。负染色是将细菌细胞和背景着色,从而把无色透明、不着色的荚膜结构衬托显现出来。菌体荚膜菌胶团:多个菌体的荚膜融合为一个团状物,内有多个菌体。菌胶团4芽孢染色1细菌芽孢壁厚而致密,透性低,难于染色,但一旦被染色又难于脱色。因此先用强着色力的染料(孔雀绿)处理,并同时加热,使菌体以及芽孢均着色,后使菌体脱色,而芽孢保留原色,经复染(蕃红),菌体与芽孢分别以不同颜色显现。2芽孢3菌体菌体芽孢对有芽孢的菌体进行简单染色(只用一种染料染色)。菌体和芽孢着色情况如何?菌体芽孢三实验材料单击此处添加正文,文字是您思想的提炼,为了演示发布的良好效果,请言简意赅地阐述您的观点。细菌特殊形态标本片:枯草芽孢杆菌芽孢片04单击此处添加正文,文字是您思想的提炼,为了演示发布的良好效果,请言简意赅地阐述您的观点。八叠球菌片03单击此处添加正文,文字是您思想的提炼,为了演示发布的良好效果,请言简意赅地阐述您的观点。枯草杆菌片02单击此处添加正文,文字是您思想的提炼,为了演示发布的良好效果,请言简意赅地阐述您的观点。细菌基本形态标本片:大肠杆菌片01悬滴法观察活细菌的运动示范片观察:荚膜片观察05四实验内容及步骤细菌基本形态观察细菌特殊结构观察悬滴法观察活细菌运动1细菌基本形态观察学习油镜的正确使用方法。用油镜观察——大肠杆菌枯草杆菌八叠球菌2细菌特殊结构观察学习油镜的正确使用方法。用油镜观察细菌特殊结构——枯草芽孢杆菌芽孢(油镜)钾细菌荚膜(高倍镜)(示范)荚膜菌体菌胶团菌体芽孢
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