基因工程操作程序(共22张).pptx

基因工程操作程序;;二、基因表达载体的构建——基因工程的核心;位于基因的首端的一段特殊的DNA片断，是RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能驱动基因转录出mRNA，最终获得蛋白质，但启动子本身不被转录;鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将有目的基因的细胞筛选出来;寻根问底：将目的基因直接导入受体细胞不是更简便吗？如果这么做，结果会怎样？;三、将目的基因导入受体细胞;1、将目的基因导入植物细胞的方法：农杆菌转化法

（1）农杆菌介绍：

（2）原理

（3）适用范围;适用于

单子叶植物;花粉管通道法;2、将目的基因导入动物细胞

（1）方法：显微注射法

（2）程序：

;用口径为1μm的DNA注射器，将大量的目的基因片段注入到受精卵的核内，然后把经过注射的受精卵移植到另一只雌性动物的子宫内，使受精卵发育为转基因动物。;

3、将目的基因导入微生物细胞

（1）原核生物特点：

繁殖快、单细胞、遗传物质少

（2）方法：

;;微生物细胞;四、目的基因的检测与鉴定;①检测转基因生物染色体的DNA上是否插入

了目的基因;第十八页，共22页。;;②检测目的基因是否转录出了mRNA;3、将目的基因导入微生物细胞

②检测目的基因是否转录出了mRNA

将目的基因导入植物细胞

抗体？将目的基因编码的蛋白质注射进

提示：有人采用总DNA注射法进行遗传转化，即将一个生物中的总DNA提取出来，通过注射或花粉管通道法导入受体植物，没有进行表达载体的构建，这种方法针对性差，完全靠运气，也无法确定什么基因导入了受体植物。

1、使目的基因在受体细胞中稳定存在，且可以遗传给下一代，

首先取出转基因生物的基因组DNA

2、使目的基因能够表达和发挥作用。

用上述探针和转基因生物的mRNA杂交，若出现杂

抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等

交带，表明目的基因转录出了mRNA.

寻根问底：将目的基因直接导入受体细胞不是更简便吗？如果这么做，结果会怎样？

2、将目的基因导入动物细胞

②检测目的基因是否转录出了mRNA

①检测转基因生物染色体的DNA上是否插入

寻根问底：将目的基因直接导入受体细胞不是更简便吗？如???这么做，结果会怎样？