定量分析方法与验证.pptVIP

一、准确度(Accuracy)指测得结果与真实值接近的程度。通常采用回收率试验来表示。1、定义：01回收试验法（原料药）：空白+已知量A的对照品（或标准品）测定，测定值为M2、方法：02制剂可采用空白辅料中加入原料药对照品法。还应作单独辅料的空白测定。01加样回收试验（中药）已准确测定药物含量P的真实样品+已知量A的对照品（或标准品）测定，测定值为M02UV、HPLC回收率要求在98～102%范围容量分析法回收率要求在99.7～100.3%范围中药分析回收率一般要求在95～105%范围内，有些方法操作步骤繁多时，可要求在90～110%范围内。RSD一般在3%以内。01数据要求规定的范围内，至少用9次测定结果评价，如制备三个不同浓度样品各测三次。02（二）精密度(Precision)定义：系指在规定的测试条件下，同一个均匀供试品，经多次取样测定所得结果之接近的程度。常用标准差（SD）或相对标准差（RSD）表示。在相同条件下，由同一个分析人员测定所得结果的精密度。01在规定的范围内，至少用9次测定结果评价，如制备三个不同浓度样品，各测三次。02或把被测物浓度当作100%，至少测6次计算RSD进行评价。031.重复性同一实验室，不同时间由不同分析人员用不同设备所得结果的精密度。01考察随机变动因素的影响。变动因素为不同日期、不同分析人员、不同设备。022.中间精密度不同实验室，不同分析人员测定结果的精密度。0102当分析方法将被法定标准采用时，应进行重现性试验。3.重现性（三）专属性（specificity）指有其他成分（杂质、降解物、辅料等）可能存在情况下采用的方法能准确测定出被测物的特性，能反映该方法在有共存物时对供试物准确而专属的测定能力。是指该法用于复杂样品分析时相互干扰程度的度量。氧氟沙星乳膏的含量测定图谱乳膏基质01样品020102系指试样中被测物能被检测出的最低量。无需定量测定。常用%、ppm、ppb表示。它既反映方法与仪器的灵敏度和噪音的大小，也表明样品经处理后空白(本底)值的高低。定义：（四）检测限(limitofdetection，LOD)2、方法：2、方法：信噪比法（仪器分析方法）：HPLC、GC：用已知浓度样品与空白试验对照，记录测得的被测药物信号强度S与噪音(或背景信号)强度N，以能达到S／N＝2或S／N＝3时的样品最低药浓为LOD；UV或荧光分析：多次空白试验，求得其背景响应的标准差，将三倍空白标准差(即3δ空或3S空)作为检测限的估计目视法（非仪器分析方法）：通过已知浓度的样品，目视确定能被可靠地检测出的最低量作为检测限。定义：01指在具有一定准确度和精密度的前提下，样品中被测物能被定量测定的最低浓度或量。常用%、ppm、ppb表示杂质和降解产物定量测定时需确定定量限。02（五）定量限

(limitofquantitation，LOQ)非仪器分析方法：与检测限的确定方法相同；仪器分析方法：S/N=10时相应的浓度，作为定量限的估计值。定量限与检测限的差别：定量限要定量测定某一药物在样品介质中的最低浓度，且定量限规定的最低浓度应该符合一定的精密度和准确度的要求。2、方法：线性：在设计的范围内，测试结果与试样中被测物浓度直接呈正比关系的程度。线性范围：指达到一定精密度、准确度和线性的条件下，测试方法适用的高低限浓度或量的区间。可用mg／L~mg／L、μg／ml~ug／ml等表示。1、定义：（六）线性与范围

(linearityandrange)线性与范围的确定可用作图法(响应值Y／浓度X)或计算回归方程(Y＝a+bX)来研究建立。ACB采用相关系数(r)表示标准曲线的线性度。对照品的LOQ必须包括在线性范围。2、方法：STEP2STEP1定义：指在测定条件有小的变动时，测定结果不受影响的承受程度。变动因素：溶液稳定性、不同的测试耗用时间、不同的分析温度、不同的测定日期、流动相的组成和pH，商品柱的品牌，柱温等。（七）耐用性(robustness)检验项目和验证内容①②③①已有重现性验证，不需验证中间精密度②如一种方法不够专属，可用其他分析方法予以补充③视具体情况予以验证准确度精密度重复性中间精密度专属性检测限定量限线性/范围耐用性鉴别＋＋杂质定量＋－＋＋＋－＋＋＋杂质限度＋＋含量测定＋＋＋＋＋－－＋＋溶出量测定＋＋＋＋＋－－＋＋01