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尿液蛋白质检验一.pptVIP

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方法原理双缩脲法蛋白质与碱性铜溶液作用,形成紫色缩合物。比浊法酸性条件下,生物碱类试剂与蛋白质结合沉淀。染料结合法染料与蛋白质结合后最大吸收峰发生漂移。三、尿液蛋白质的检验尿液蛋白质定量如何选择这些定量方法?三、尿液蛋白质的检验?方法方法优缺点双缩脲法蛋白质测定经典方法,但灵敏度较低比浊法操作简便,线性范围窄,影响因素多染料结合法显色稳定,容易对比色器皿造成污染尿液蛋白质定量根据实验室条件选择合适的定量方法。加强尿液蛋白质定量的质量控制非常必要!卫生部临检中心推荐双缩脲法和丽春红S法。010203尿液蛋白质定量三、尿液蛋白质的检验尿液蛋白质分类01SDS凝胶电泳02双向凝胶电泳03??????04尿液蛋白质的检验05BACSDS与蛋白质结合,消除了蛋白质分子中的蛋白质按分子量大小相互分离。电荷差异,再通过聚丙烯酰胺的分子筛作用,将尿液蛋白质分类:SDS凝胶电泳三、尿液蛋白质的检验尿液蛋白质的检验01尿液标本02葡聚糖、PEG等03SDS凝胶电泳04染色、光密度扫描05***病例01患者,男,68岁,因浮肿、无尿入院。入院前因上呼吸道感染多次使用庆大霉素和复方新诺明而出现浮肿,尿量进行性减少。体格检查:眼睑浮肿,双下肢可凹性水肿。初步诊断为什么疾病?要明确诊断需要哪些进一步的实验室检查?02急性肾小管坏死0301尿液蛋白质检验02UrineProteinAnalysis03黄辉教学目标了解蛋白尿的定义一理解蛋白尿形成的原因和机制二掌握尿液蛋白质检查的检测原理、方法学评价、质量保证及临床意义三教学内容蛋白尿的定义一蛋白尿形成的原因和机制二尿液蛋白质的检验三尿液蛋白质检验的临床意义四一、蛋白尿的定义肾小球的滤过肾小管与集合管的重吸收肾小管的分泌正常人尿液中蛋白质的含量很少!01.02.03.04.健康人尿液蛋白质含量很少,当尿液蛋01白质超过150mg?24h-1或超过100mg?L-1时,蛋02白质定性试验为阳性称为蛋白尿(proteinuria)。03一、蛋白尿的定义二、蛋白尿形成的原因和机制肾性蛋白尿renalproteinuria肾小球性蛋白尿glomerularproteinuria混合性蛋白尿mixedproteinuria肾小管性蛋白尿tubularproteinuria肾前性蛋白尿prerenalproteinuria溢出性蛋白尿overflowproteinuria123二、蛋白尿形成的原因和机制postrenalproteinuria肾后性蛋白尿histicproteinuria组织性蛋白尿二、蛋白尿形成的原因和机制蛋白尿形成的原因和机制01肾小球性蛋白尿:02蛋白尿的选择性03选择性蛋白尿:肾小球损伤程度04较轻,以分子量4~9万中相对分05子量的白蛋白为主。06非选择性蛋白尿:肾小球损伤程07度较重,尿液中大分子量蛋白质08和中分子量蛋白质同时存在。09二、蛋白尿形成的原因和机制蛋白尿种类病变部位尿液蛋白质特点肾小球性蛋白尿肾小管性蛋白尿混合性蛋白尿溢出性蛋白尿组织性蛋白尿二、蛋白尿形成的原因和机制蛋白尿种类病变部位尿液蛋白质特点肾小球性蛋白尿肾小球中分子量蛋白、大分子量蛋白质增加肾小管性蛋白尿肾小管小分子量蛋白质增加为主混合性蛋白尿肾小球、肾小管肾小球、肾小管受损程度不同而有一定的差异溢出性蛋白尿肾前性小分子量蛋白质组织性蛋白尿肾小管、泌尿组织T-H蛋白质增加为主尿液中有无蛋白质?尿液中蛋白质的量?尿液中有哪一类蛋白质?三、尿液蛋白质的检验DCBA蛋白质理化性质蛋白质的两性电离和等电点蛋白质的变性蛋白质的沉淀E蛋白质的呈色反应三、尿液蛋白质的检验尿液蛋白质定性加热乙酸法干化学试带法尿液蛋白质的检验磺基水杨酸法2蛋白质5蛋白质沉淀3加热6稀乙酸1尿液蛋白质定性:加热乙酸法4蛋白质变性三、尿液蛋白质的检验尿液蛋白质的检验尿液蛋白质定性:加热乙酸法方法经典而准确,为蛋白定性确证实验;特异性强,干扰因素少;灵敏度较低,为150mg/L;pH值、盐离子浓度对实验结果的影响。AEDFBC蛋白

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