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50L生物反应器实验报告（B50-24）

1.50L生物反应器工艺研究

1）实验目的

在5L、10L生物反应器实验的基础上，通过50L生物反应器进行工艺的

进一步放大和确认，以确定出更好的实验参数，供200L放大时参考、使用。

2）实验设计

先后进行了3批50L规模的放大实验，实验的条件设计见表2-8所示，由于

在7L生物反应器中FeedB8的细胞生长和产量均好于FeedC0，因此第1罐50L

实验采用FeedB8为补料培养基。在Ambr实验中已知FeedC0可得到与FeedB8

不荷分布的抗体，担心它们在体内PK/PD也有差异，所以第2罐采用Feed

C0以取得样品，作为备份。在第1罐实验中由于在18天发生断氧意外，所以进

行了第3罐重复第1罐的工艺。在50L反应器上，考虑到体积较大，温度控制

比较缓慢，为了防止温度波动导致的局部温度过高（37.5°C），所以温度控制点

设为36.8°C。

表2-8：50L生物反应器实验设计表

实验代号C-46C-48C-50

细胞10-16D4-1B5-4000

666

接种密度1×10cell/ml0.5×10cell/ml1×10cell/ml

Day0-4:36.8℃;

温度

Day4-21:35.0℃

溶氧50%

搅拌转速70-80rpm60-70rpm80rpm

扩种过程(L)0.02-0.09-0.1-0.1-0.08-0.35-3.7-32.50.02-0.0825-0.5-

0.9-4.5-351.5-14-31.5

基础培养基CDFortiCHO™AGT™Medium+0.877g/LL-Glutamine

补料培养基FeedB8FeedC0FeedB8

补料速率系数755075

葡萄糖补加至3g/L3g/LDay0-13:3g/L;

Day14-20:4g/L

培养时间192121

3）实验结果

①细胞生长

50L反应器上的C-46的细胞生长曲线和平行进行的7L反应器中的C-47表

7

现相似，最高密度均达到1.4~1.5×10cell/ml，在第11-12天后进入稳定期。C-48

6

在7L反应器进行的C-49细胞生长也相似，最高密度为8×10cell/ml，在第11

天后进入稳定期（图2-44、图2-45）。因此可以初步认为50L生物反应器的放大

基本成功。比较C-46和C-48可以看出，F