紫外可见分光光度法 (9).ppt

*三、光的吸收定律透过率T—入射光透过溶液的程度T=It/I0吸光度A与透过率T的关系:A＝－lgT第30页，共75页，星期日，2025年，2月5日*偏离朗伯—比耳定律的原因当溶液浓度较高时，标准曲线常发生弯曲，称为偏离朗伯—比耳定律。原因物理性因素化学性因素第31页，共75页，星期日，2025年，2月5日*物理性因素难以获得真正的纯单色光——仪器的原因选择比较好的单色器将入射波长选定在待测物质的最大吸收波长且吸收曲线较平坦处解决办法前提条件之一：入射光为单色光第32页，共75页，星期日，2025年，2月5日*化学性因素假定：所有的吸光质点之间不发生相互作用当溶液浓度c10－2mol/L时，吸光质点间可能发生缔合等相互作用，直接影响了对光的吸收。溶液中存在着离解、聚合、互变异构、配合物的形成等化学平衡时。使吸光质点的浓度发生变化，影响吸光度第33页，共75页，星期日，2025年，2月5日*例：铬酸盐或重铬酸盐溶液中存在下列平衡：CrＯ42-＋2H＋=Cr2Ｏ72-＋H2Ｏ溶液中CrＯ42-、Cr2Ｏ72-的颜色不同，吸光性质也不相同,故溶液pH对测定有重要影响.第34页，共75页，星期日，2025年，2月5日*四、紫外可见分光光度计第35页，共75页，星期日，2025年，2月5日*四、紫外可见分光光度计第36页，共75页，星期日，2025年，2月5日*HitachiU3010紫外可见分光光度计普析通用TU-1221型紫外可见分光光度计四、紫外可见分光光度计第37页，共75页，星期日，2025年，2月5日*波长330~800nm722型光栅分光光度计四、紫外可见分光光度计第38页，共75页，星期日，2025年，2月5日光度计的基本结构光源单色器狭缝样品室检测器第39页，共75页，星期日，2025年，2月5日*在整个紫外光区或可见光谱区可以发射连续光谱具有足够的辐射强度较好的稳定性较长的使用寿命可见光区：钨灯作为光源，其辐射波长范围在320～2500nm。紫外区：氢、氘灯，发射185～400nm的连续光谱。光源第40页，共75页，星期日，2025年，2月5日*将光源发射的复合光分解成单色光并可从中选出一任波长单色光的光学系统。单色器棱镜、光栅第41页，共75页，星期日，2025年，2月5日狭缝狭缝是指由一对隔板在光通路上形成的缝隙，用来调节入射单色光的纯度和强度，也直接影响分辩力。出射狭缝的宽度通常有两种表示方法：一为狭缝的实际宽度，以毫米（mm）表示，另一种为光谱频带宽度，即指由出射狭缝射出光束的光谱宽度，以毫微米nm表示。例如，出射狭缝的宽度是6nm，并不是说出射狭缝的宽度是6nm，而是指由此狭缝射出的光具有6nm的光谱带宽。

第42页，共75页，星期日，2025年，2月5日*样品室在紫外区须采用石英池，可见区一般用玻璃池。第43页，共75页，星期日，2025年，2月5日*利用光电效应将透过吸收池的光信号变成可测的电信号检测器光电池、光电管或光电倍增管。结果显示记录系统检流计、数字显示、微机进行仪器自动控制和结果处理第44页，共75页，星期日，2025年，2月5日单光束仪器HW红蓝S1S2单色器样品室第45页，共75页，星期日，2025年，2月5日单光束仪器的缺点：操作麻烦： 空白——IO样品——I任一波长不能进行吸收光谱的自动扫描光源不稳定性影响测量精密度第46页，共75页，星期日，2025年，2月5日*双光束仪器IOI第47页，共75页，星期日，2025年，2月5日*双光束仪器的特点和不足：测量方便，不需要更换吸收池补偿了仪器不稳定性的影响实现了快速自动吸收光谱扫描不能消除试液的背景成分吸收干扰第48页，共75页，星期日，2025年，2月5日*双波长仪器切光器?1?2采用双单色器第49页，共75页，星期日，2025年，2月5日*?/nmA0200300400待测成分干扰成分?1?2第50页，共75页，星期日，2025年，2月5日*消除光谱重叠干扰A?1=Aa?1