PCR基因扩增仪习题.docxVIP

PCR基因扩增仪习题

1.PCR技术中，以下哪个成分不是PCR反应的必需成分？

A.Taq酶

B.引物

C.模板DNA

D.硫酸

答案：D.硫酸

2.在PCR反应中，以下哪个步骤是变性DNA双链的过程？

A.退火

B.延伸

C.变性

D.循环

答案：C.变性

3.PCR反应中的变性温度通常是多少？

A.95°C

B.50°C

C.72°C

D.37°C

答案：A.95°C

填空题

1.PCR全称为______，是一种在______小时内扩增特定DNA片段的技术。

答案：聚合酶链反应(PolymeraseChainReaction)，几小时

2.在PCR反应中，通常需要使用______作为DNA模板的复制起点。

答案：引物

3.PCR反应中的退火温度通常设定在______到______之间。

答案：50°C到65°C

判断题

1.PCR反应中，Taq酶可以在高温下稳定工作，因此变性步骤不会破坏其活性。(正确/错误)

答案：正确

2.PCR反应中，延伸步骤的温度通常设定在72°C，这个温度是Taq酶的最佳工作温度。(正确/错误)

答案：正确

3.PCR反应中，引物设计是无关紧要的，因为任何引物都能成功扩增目标DNA。(正确/错误)

答案：错误

解答题

1.简述PCR反应的基本原理及步骤。

答案：

基本原理：PCR是一种在体外模拟DNA复制过程的技术，通过使用DNA模板、引物、四种脱氧核苷酸和DNA聚合酶来扩增特定的DNA片段。

步骤：

1.变性：将DNA模板加热至95°C，使双链DNA变性为单链。

2.退火：降低温度至50°C至65°C，使引物与模板DNA互补序列结合。

3.延伸：温度通常在72°C左右，Taq酶开始从引物3端开始合成新的DNA链。

4.循环：重复变性、退火和延伸步骤，通常25至35个循环可以扩增到足够的DNA量。

2.为什么在PCR反应中需要使用缓冲液？

答案：

在PCR反应中，缓冲液提供了稳定的pH环境，这对于Taq酶的活性和DNA的变性都是至关重要的。

缓冲液还可以提供适当的离子强度，有助于引物与模板的结合以及DNA聚合酶的活性。