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第2课时动物细胞融合技术与单克隆抗体
[学习目标]1.阐明动物细胞融合技术的概念,举例说出诱导动物细胞融合的方法。2.概述单克隆抗体的制备过程。
一、动物细胞融合技术
1.概念:使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。
2.原理:细胞膜的流动性。
3.诱导融合的方法eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(PEG融合法,电融合法,灭活病毒诱导法))
特别提醒灭活病毒诱导细胞融合的原理:病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用,使细胞互相凝聚,细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布,细胞膜打开,细胞发生融合。
4.意义:细胞融合技术突破了有性杂交的局限,使远缘杂交成为可能。
5.应用
(1)成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和培育生物新品种等的重要手段。
(2)用于制造单克隆抗体。
判断正误
(1)与植物原生质体融合相比,动物细胞融合特有的诱导因素有聚乙二醇(PEG)、灭活的病毒()
(2)灭活的含义是用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力,但并不破坏它们的抗原结构()
答案(1)×(2)√
提示(1)与植物原生质体融合相比,动物细胞融合特有的诱导因素是灭活的病毒。
任务一:动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较
1.19世纪30年代,科学家曾在患肺结核、天花和麻疹等疾病的病人的病理组织中,观察到多核细胞。如何解释这一现象?
提示病人体内的病毒等诱导多个体细胞融合形成了多核细胞。
2.比较动物细胞融合技术和植物体细胞杂交技术
(1)原理不同:动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性;植物体细胞杂交技术的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。
(2)诱导方法不同:两者都可用聚乙二醇(PEG)融合法和电融合法诱导融合;但动物细胞还可用灭活病毒诱导法诱导细胞融合。
(3)最终结果不同:动物细胞融合最终得到的是杂交细胞,而植物体细胞杂交技术最终得到的是杂种植株。
1.如图表示仙台病毒诱导动物细胞融合的部分过程,下列叙述正确的是()
A.细胞A和细胞B必须为同种细胞才能融合
B.细胞C同时有细胞A和细胞B的遗传物质
C.该融合过程体现了细胞膜具有选择透过性
D.此过程的原理是动物细胞具有全能性
答案B
解析不同种的细胞也能融合,如人、鼠细胞融合,A错误;如图所示,细胞A、B融合成一个细胞C,细胞C同时有细胞A和细胞B的遗传物质,B正确;该融合过程体现了细胞膜具有流动性,C错误;此过程的原理是动物细胞膜具有流动性,D错误。
2.对比动物细胞融合和植物体细胞杂交技术,下列论述合理的是()
A.均可使用PEG、电融合或灭活病毒诱导细胞融合
B.两者都可以跨越种属间的生殖隔离
C.两者都可以体现细胞的全能性
D.在适宜的条件下,均可产生完整个体
答案B
解析灭活病毒是动物细胞融合特有的诱导因素,A错误;动物细胞融合和植物体细胞杂交技术都可以打破生殖隔离,B正确;植物体细胞杂交技术体现了细胞的全能性,动物细胞融合技术体现了细胞膜具有流动性,C错误;目前,动物细胞融合技术不能产生完整个体,D错误。
二、单克隆抗体及其应用
1.传统抗体的获得
(1)方法:向动物体内反复注射某种抗原,使动物产生抗体,然后从动物血清中分离所需抗体。
(2)缺陷:产量低、纯度低、特异性差。
2.单克隆抗体的制备
(1)大量制备单一抗体的思路
(2)存在的问题:B淋巴细胞不可能无限增殖。
(3)解决方案
(4)制备过程
3.单克隆抗体的优点
(1)能准确地识别抗原的细微差异。
(2)可以与特定抗原发生特异性结合。
(3)可以大量制备。
4.单克隆抗体的应用
(1)用作诊断试剂,可定位诊断肿瘤、心血管畸形等疾病。
(2)运载药物,如ADC(抗体—药物偶联物)。
(3)直接用于治疗疾病。
判断正误
(1)B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合后,得到的都是杂交瘤细胞()
(2)单克隆抗体制备过程中两次筛选的目的相同()
(3)ADC的抗体具有靶向运输作用、药物具有治疗作用()
答案(1)×(2)×(3)√
提示(1)B淋巴细胞与骨髓瘤细胞如两两融合,得到的融合细胞有3种,即B淋巴细胞自身融合细胞、骨髓瘤细胞自身融合细胞和杂交瘤细胞,需要筛选才能得到杂交瘤细胞。(2)单克隆抗体制备过程中第一次筛选是为了筛选出杂交瘤细胞,第二次筛选是为了获得能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。
任务二:单克隆抗体的制备过程和单克隆抗体的应用
1.根据单克隆抗体的制备过程,回答以下问题:
(1)给小鼠注射特定抗原的目的是使小鼠产生能分泌特定抗体的B淋巴细胞。
(2)B淋巴细胞与骨髓瘤细胞经诱导融合后,培养基中共出现5种细胞。若只考虑两两融合,理论上培养基中融合的细胞有3种。体系中出现多种类型细胞的原因是细胞融合是随机的,且融合率达不
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