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第1节植物细胞工程
第1课时植物细胞工程的基本技术
[学习目标]1.概述植物组织培养的原理和过程。2.概述植物体细胞杂交的原理和过程。
一、细胞工程概念及植物组织培养技术
1.细胞工程
(1)概念:应用细胞生物学、分子生物学和发育生物学等多学科的原理和方法,通过细胞器、细胞或组织水平上的操作,有目的地获得特定的细胞、组织、器官、个体或其产品的一门综合性的生物工程。
(2)分类:依据操作对象分为植物细胞工程和动物细胞工程。
2.细胞的全能性
(1)概念:细胞经分裂和分化后,仍然具有产生完整生物体或分化成其他各种细胞的潜能。
(2)在生物的生长发育过程中,并不是所有细胞都表现出全能性的原因:在特定的时间和空间条件下,细胞中的基因会选择性地表达。
3.植物组织培养:将离体的植物器官、组织或细胞等,培养在人工配制的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其形成完整植株的技术。这些离体培养的植物器官、组织或细胞被称为外植体。
4.菊花的组织培养
(1)原理
①理论基础:植物细胞的全能性。
②相关概念
愈伤组织:细胞排列疏松且无规则、高度液泡化、不定形的薄壁组织团块。
脱分化:已经分化的细胞,经过诱导,失去其特有的结构和功能而转变成未分化细胞的过程。
再分化:愈伤组织重新分化成芽、根等器官的过程。
③激素的作用:植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键激素,它们的浓度、比例等都会影响植物细胞的发育方向。
(2)步骤
判断正误
(1)植物体的任何细胞都具有全能性,也都能表现出全能性()
(2)在植物组织培养时,对外植体要进行灭菌处理()
(3)若用菊花茎切段作为外植体,应将其形态学上端插入诱导愈伤组织的培养基中()
(4)诱导生芽的培养基和诱导生根的培养基完全一样()
答案(1)×(2)×(3)×(4)×
提示(1)植物细胞一般具有全能性,但并不是具有全能性的细胞都能表达全能性,细胞全能性的表达需要一系列条件。(2)在植物组织培养时,对外植体要进行消毒处理。(3)若用菊花茎切段作为外植体,应将其形态学下端插入诱导愈伤组织的培养基中。(4)生长素与细胞分裂素的比值高时,有利于根的分化、抑制芽的形成;比值低时,有利于芽的分化、抑制根的形成,因此诱导生芽的培养基和诱导生根的培养基不完全相同。
任务一:植物组织培养的过程和条件
1.请结合图中植物组织的变化,思考回答下列问题:
(1)概括出植物组织培养的技术流程图。
提示外植体eq\o(―――→,\s\up7(脱分化))愈伤组织eq\o(―――→,\s\up7(再分化))芽、根等―→试管苗eq\o(――――→,\s\up7(驯化移栽))完整植株。
(2)图中的愈伤组织细胞与叶肉细胞相比,不含有的细胞器是叶绿体,原因是外植体经过诱导后,失去其特有的结构和功能而转变成未分化的细胞。
2.请结合菊花组织培养的实验步骤,思考回答下列问题:
(1)为什么要强调所用器械的灭菌和实验人员的无菌操作?
提示避免杂菌与培养物竞争营养,且有些杂菌会危害培养物的生长。
(2)菊花组织培养过程中,诱导外植体脱分化形成愈伤组织的培养基,其成分中包含(填“包含”或“不包含”)蔗糖等有机物,因为此时外植体不能进行光合作用制造有机物,需要依赖环境中的有机物才能生存。
(3)在一定的激素和营养等条件的诱导下,已经分化的细胞可以经过脱分化转变成愈伤组织。植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键激素。
(4)在植物组织培养的过程中,光照条件的控制:脱分化过程中一般不需要光照,再分化过程中需要给予适当时间和强度的光照。
1.植物组织培养的条件:(1)离体;(2)无菌;(3)培养基(种类齐全、比例合适的营养物质及一定比例的植物激素);(4)适宜的培养条件(温度、光照等)。
2.生长素和细胞分裂素用量的比例对植物细胞发育方向的影响
生长素用量与细胞分裂素用量的比值
结果
比值高
有利于根的分化,抑制芽的形成
比值低
有利于芽的分化,抑制根的形成
比值适中
促进愈伤组织的形成
[拓展阅读]愈伤组织的细胞排列疏松且无规则,是一种高度液泡化的无定形状态的细胞。愈伤组织形成以后,如果在原来的培养基上继续培养,就会由于培养基中养分不足或产生有毒代谢物,导致愈伤组织生长停止,甚至老化变黑乃至死亡。如果要愈伤组织继续生长增殖,必须定期地将它们分成小块,接种到新鲜的培养基上,这样愈伤组织就可以长期保持旺盛的生长。愈伤组织的再分化主要有两种方式:一种是不定芽方式,就是在某些条件下,愈伤组织的细胞发生分化,形成不同的器官原基,再逐渐形成芽和根;另一种是胚状体方式,就是由愈伤组织诱导分化出的具有胚芽、胚根、胚轴的类似胚的结构。能够产生胚状体的愈伤组织常见于胡萝卜、芦笋、玉米和小
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