2024-2025学年高二生物人教版选择性必修3同步练习 实验微专题一 DNA的粗提取与鉴定.docx

实验微专题一DNA的粗提取与鉴定

一、实验原理

1.提取DNA的原理

利用DNA、RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分。

如：(1)DNA在酒精溶液中的溶解性：DNA不溶于酒精，但某些蛋白质溶于酒精。

(2)DNA在NaCl溶液中的溶解性：DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同，它能溶于2__mol/L的NaCl溶液。

2.鉴定DNA的原理

在一定温度下，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色。

二、方法步骤

1.称取约30g洋葱，切碎，然后放入研钵中，倒入10mL研磨液，充分研磨。

2.去除滤液中的杂质

3.DNA的析出

4.DNA的鉴定

取两支20mL的试管，各加入2mol/L的NaCl溶液5mL。将丝状物或沉淀物溶于其中一支试管的NaCl溶液中，再向两支试管中各加入4mL的二苯胺试剂。混合均匀后，将试管置于沸水中加热5min。待试管冷却后，比较两支试管中溶液颜色的变化。

★沸水浴下DNA与二苯胺试剂反应，溶液呈现蓝色

三、操作提示

1.以血液为实验材料时，每100mL血液中需要加入3g柠檬酸钠，防止血液凝固。

2.加入酒精和用玻璃棒搅拌时，动作要轻缓，以免加剧DNA分子的断裂，导致DNA分子不能形成絮状沉淀。

(1)充分研磨的目的是裂解细胞，释放DNA。

(2)在研磨液过滤获得的上清液中加入体积分数为95%的酒精溶液的目的是使DNA析出(填“溶解”或“析出”)，依据的原理是DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质溶于酒精。

(3)用玻璃棒搅拌时沿一个方向搅拌的目的是防止DNA断裂。

例1下表关于“DNA粗提取与鉴定”实验的表述，错误的是()

选项

试剂

操作

作用

A

研磨液

与生物材料混合

提取溶解DNA

B

2(mol·L－1)NaCl溶液

与提取出的DNA混合

溶解DNA

C

预冷的酒精

加入离心后的上清液中

溶解DNA

D

二苯胺试剂

加入溶解有DNA的NaCl溶液中

鉴定DNA

答案C

解析DNA不溶于酒精，但是细胞中的某些蛋白质溶于酒精，利用这一原理可以将蛋白质和DNA进一步分离，C错误。

例2下列有关“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，正确的是()

A.新鲜猪血、菜花等动植物材料均可用于DNA的粗提取

B.植物材料需先研磨破碎细胞

C.DNA只能溶于2mol/L的NaCl溶液

D.溶有DNA的NaCl溶液中加入二苯胺试剂后颜色呈紫色

答案B

解析猪是哺乳动物，其成熟红细胞内没有细胞核，所以猪血不能用于DNA的粗提取，A错误；植物细胞有细胞壁，因此选用植物细胞提取DNA时，需先研磨破碎细胞，B正确；DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，在2mol/L的NaCl溶液中溶解度高，C错误；溶有DNA的NaCl溶液中加入二苯胺试剂，沸水浴加热后冷却，颜色应呈现蓝色，D错误。

DNA的粗提取与鉴定实验成功关键点

(1)本实验不能用哺乳动物成熟的红细胞作实验材料，原因是哺乳动物成熟的红细胞无细胞核(无DNA)，可选用鸡血细胞作材料。(2)二苯胺试剂要现配现用，否则会影响鉴定的效果。(3)提取植物细胞的DNA，在研磨时加入NaCl的目的是溶解DNA。(4)在DNA进一步提纯时，选用预冷的体积分数为95%的酒精的作用是溶解杂质和析出DNA。