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教材经典实验归类
一.观察DNA和RNA在细胞中的分布
实验原理:DNA遇甲基绿呈绿色,RNA可被吡罗红染成红色。
实验步骤
步骤
器材与试剂
作用与原理
〔1〕制片
①将牙签刮下的口腔上皮细胞置于载玻片上0.9%的NaCl溶液滴
②载玻片烘干
1 0.9%的NaCl溶液防止细胞破裂,
维持细胞形态。
2 烘干使细胞固定在载玻片上
〔2〕水解
8%HCl中30℃保温5分钟
盐酸能改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞,同时使染色体中的DNA与蛋白质别离。
〔3〕冲洗
用蒸馏水缓流冲洗10分钟
〔4〕染色
2滴吡罗红甲基绿染色5分钟
甲基绿使DNA染上绿色
吡罗红使RNA染上红色
〔5〕观察
显微镜下观察
实验结果:细胞核呈绿色,细胞质呈红色。
分布:真核生物的DNA主要分布在细胞核中,线粒体和叶绿体内也含有少量的DNA;RNA主要分布在细胞质中。
二.检测生物组织中复原糖、脂肪和蛋白质
实验原理:可溶性糖中的复原糖〔如葡萄糖、果糖、麦芽糖〕,与斐林试剂发生作用,可以生成砖红色的沉淀。脂肪可以被苏丹Ⅲ染成橘黄色。蛋白质与双缩脲试剂发生作用,可以产生紫色反响。
1.复原糖的检测
复原性糖:有复原性基团——游离醛基或酮基的糖;如葡萄糖、果糖、麦芽糖。
〔1〕材料的选取:复原糖含量高,白色或近于白色,如苹果,梨,白萝卜。
〔2〕试剂:斐林试剂〔甲液:0.1g/mL的NaOH溶液,乙液:0.05g/mL的CuSO4溶液〕,现配现用。
〔3〕步骤:取样液2mL于试管中→参加刚配的斐林试剂1mL〔斐林试剂甲液和乙液等量混合均匀后再参加〕→水浴加热2min左右→观察颜色变化〔浅蓝色→棕色→砖红色〕
2.脂肪的检测
〔1〕材料的选取:含脂肪量越高的组织越好,如花生的子叶。
〔2〕步骤:制作切片〔切片越薄越好〕将最薄的花生切片放在载玻片中央
↓
染色〔滴苏丹Ⅲ染液2~3滴切片上→2~3min后吸去染液→滴体积分数50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精〕
↓
制作装片〔滴1~2滴清水于材料切片上→盖上盖玻片〕
↓
镜检鉴定〔显微镜对光→低倍镜观察→高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒〕
3.蛋白质的检测
〔1〕试剂:双缩脲试剂〔A液:0.1g/mL的NaOH溶液,B液:0.01g/mL的CuSO4溶液〕
〔2〕步骤:试管中加样液2mL→加双缩脲试剂A液1mL,摇匀→加双缩尿试剂B液4滴,摇匀→观察颜色变化(紫色)
三.显微镜的使用
1.显微镜的使用:取镜→安放→对光→压片→观察→收镜。
〔1〕低倍镜使用:〔观察任何标本都必须先用低倍镜,且标本应透明〕
〔2〕高倍镜使用:
先使用低倍镜确定目标→移动装片,使目标位于视野中央→转动转换器,换用高倍镜→调焦〔转动细准焦螺旋〕(视野较暗,可调反光镜或光圈)
四.用高倍镜观察线粒体和叶绿体
1.材料:新鲜藓类叶、黑藻叶或菠菜叶,口腔上皮细胞临时装片
2.原理:叶绿体在显微镜下观察,绿色,球形或椭球形。
用健那绿染液染色后的口腔上皮细胞中线粒体成蓝绿色,细胞质接近无色。
步骤
操作方法
目的与作用
〔1〕取材
①新鲜的藓类的叶
②菠菜叶下表皮略带一些叶肉
①藓类叶为单层细胞
②下表皮容易撕取,要略带些叶肉
〔2〕制片
注意叶片不能太干了,保持有水的状态
以免影响细胞活性
〔3〕观察
叶绿体呈椭圆形,可随细胞质的流动而流动。叶绿体在弱光下以最大面积〔长轴〕转向光源,在强光下以最小面积〔短轴〕转向光源。
〔1〕取材
漱口,口腔内侧壁上轻刮几下
〔2〕染色
将口腔细胞放在健那绿液滴上
〔3〕观察
盖上盖玻片,显微镜下观察,线粒体被染成蓝绿色
问题
1.为什么不用植物细胞来观察线粒体?
植物线粒体相对较少,叶绿体颜色易掩盖线粒体被染成的蓝绿色。
2.如果观察发现染色缺乏,如何补色?
在盖玻片一侧滴加健那绿液,另一侧用吸水纸吸。
五.探究影响酶活性的因素
原理:淀粉遇碘后,形成蓝色的复合物。淀粉酶可以可以使淀粉水解成麦芽糖,麦芽糖遇碘后,不形成蓝色的复合物。
1.材料:新配置的淀粉酶溶液,新鲜肝脏研磨液,可溶性淀粉溶液,过氧化氢溶液等。
2.步骤:
〔1〕探究温度对酶活性的影响
步骤
工程
试管1
试管2
试管3
1
参加可溶性淀粉溶液
2mL
2mL
2mL
2
放置在不同温度环境下5分钟
0
100
60
3
参加新配置的淀粉酶溶液
1mL
1mL
1mL
4
滴入碘液
2滴
2滴
2滴
5
观察结果
变蓝
变蓝
不变蓝
在温度对酶活性的影响的实验中,三支试管的条件,除温度外均相同。
3号试管处在60℃
2号试管的温度条件是100℃,
1号试管的温度条件是O℃,低温抑制淀粉酶的活性。
所以2号和1号试管中的淀粉都没有被分解
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