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方法步骤:(1)涂染原则:从左到右、从上到下。(2)左前肢为l号、左侧腹部2号、左后肢3号。(3)两耳后部4号、背中部5号、后肢背部6号。(4)右前肢7号、右侧腹部8号、右后肢9号。(5)尾巴根为10号。(6)额部为20号第22页,共43页,星期日,2025年,2月5日2、双色涂染法:在每组动物不超过100只的情况下用。实验动物:大鼠、小鼠。常用染色剂:(1)3-5%苦味酸溶液,可染成黄色。——作为“个”位数。(2)0.5%中性红或品红溶液,可染成红色。——作为“十”位数。第23页,共43页,星期日,2025年,2月5日方法步骤:(1)用两种颜色同时进行染色标记。(2)用苦味酸(黄色)染色标记作为个位数。(3)用品红(红色)染色标记作为十位数,(4)左前肢为10号、左侧腹部20号、左后肢30号,两耳后部40号、背部50号、后肢背部60号,右前肢70号、右侧腹部80号、右后肢90号第100号不作染色标记。第24页,共43页,星期日,2025年,2月5日3、穿耳孔法
用专用耳空器在动物耳朵不同部位打一小孔或缺口表示一定号码的方法,原则是:左耳代表十位,右耳代表个位。实验动物:兔、犬、猪4、标牌法一般挂在动物的颈部、耳朵、脚上或实验动物:犬、猴5、烙印法6、剪毛法第25页,共43页,星期日,2025年,2月5日三、实验动物编号与分组
(二)分组:1、组别的要求:正常对照组模型组阳性药组药物不同剂量组第26页,共43页,星期日,2025年,2月5日(1)正常对照组
①要求不加任何处理,指在正常条件下进行观察和对照,给药组如是灌胃给药,对照组应用灌胃溶剂。
②目的对比观察模型是否成功;观察被试药能否使病理改变恢复正常。(2)阳性药对照组
①要求所选药必须是药典所有的或国家批准的药,如用西药,则采用公认的,疗效可靠的。
②目的说明所用方法的可靠性;对比新药的优劣和特点。(3)模型对照组
①要求除不用药外,其他处理同给药组,模型要符合中医证或病的模型。
②目的对比观察受试药的药理作用。第27页,共43页,星期日,2025年,2月5日(4)药物组
■一般应设三个剂量组,大动物,操作特殊困难者可设两个剂量组;■能够测出LD50的受试药物,动物试验给药剂量一般为1/10~1/5LD50;■很多中药制剂毒性甚小,无法测出LD50者,一般常用人用剂量(g或mg生药/kg体重)来折算动物用量;■正式实验时常以等效剂量作为中剂量或小剂量,大、中、小剂量差以2~3的等比级数为宜;第28页,共43页,星期日,2025年,2月5日第29页,共43页,星期日,2025年,2月5日完全随机分组完全随机分组时将试验对象完全按随机原则分组。它的设计、分组、和统计处理都比较简单,但试验效率较低。例:将30只SD大鼠随机分配到甲、乙、丙3组。使用excel对试验对象完全随机分组的操作步骤如下:(二)分组的方法第30页,共43页,星期日,2025年,2月5日1.在单元格A1、B1、C1中分别键入编号、随机号、分组号,随后在A2、A3中分别键入1、2,然后拖动鼠标利用excel的自动填充功能完成1~30的编号。2.在B2单元格键入“=RAND()”后回车产生一个随机数字,然后同样利用其自动填充功能在B2~B31生成一列随机数。需注意的是这里产生的随机数是会随着单元格的操作而变化的。故需选中“B2”至“B31”单元格区域,复制所选中的区域,并以数据格式进行选择性粘贴。第31页,共43页,星期日,2025年,2月5日LOGOLOGOLOGOLOGOLOGOLOGOLOGOLOGOLOGO关于药理学动物实验基本方法第1页,共43页,星期日,2025年,2月5日大鼠豚鼠家兔犬一、捉持与给药小鼠第2页,共43页,星期日,2025年,2月5日小鼠的捉持1、用右手拇指和食指捏住小鼠尾巴中部将小鼠提起,放在饲养合的面罩上。用左手拇指和食指迅速、准确地捏住小鼠的两耳后及颈背部的皮肤,将小鼠提起。翻转左手掌,以左手掌心和中指夹小鼠背部的皮肤,使小鼠整个呈一条直线。用左手拇指和食指迅速、准确地捏住小鼠的两耳后及颈背部的皮肤,
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