2024-2025学年高二生物人教版选择性必修3 第3章 实验突破一 DNA的粗提取与鉴定.docx

一、实验原理

1．提取DNA的原理

利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异，选用适当的物理或化学方法提取DNA，去除其他成分。

如：(1)DNA在酒精溶液中的溶解性：DNA不溶于酒精，但某些蛋白质溶于酒精。

(2)DNA在NaCl溶液中的溶解性：DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同，它能溶于2mol/L的NaCl溶液。

2．鉴定DNA的原理

在一定温度下，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色。

二、实验步骤

三、操作提示

1．以血液为实验材料时，每100mL血液中需要加入3g柠檬酸钠，防止血液凝固。

2．加入酒精和用玻璃棒搅拌时，动作要轻缓，以免加剧DNA分子的断裂，导致DNA分子不能形成絮状沉淀。

四、关键点拨

1．利用动物细胞提取DNA时，破碎细胞的方法：动物细胞无细胞壁，可直接使其吸水涨破。

2．不能选用哺乳动物成熟的红细胞作为实验材料，原因是哺乳动物成熟的红细胞无细胞核。

3．提纯DNA时，选用体积分数为95%的冷酒精的原因：体积分数为95%的冷酒精提纯效果更佳。

4．实验中进行了2次静置或离心，目的是将DNA和杂质分子分开，第1次操作后，DNA存在于上清液中；第2次操作后DNA存在于析出的白色丝状物或离心管沉淀中。

例1(2023·邯郸高二期中)如图为DNA的粗提取与鉴定实验的部分操作流程。下列相关叙述正确的是()

A．将图1中的研磨液过滤后保留沉淀

B．图2过程中，用玻璃棒进行交叉搅拌会使DNA析出更快

C．图2析出得到的白色丝状物只能溶于2mol/L的NaCl溶液中

D．图3对提取后的DNA进行鉴定，两支试管中均要加入二苯胺试剂

答案D

解析将图1中的研磨液过滤后应保留上清液，A错误；图2过程中，用玻璃棒搅拌要轻轻搅拌且沿同一方向进行，以免加剧DNA分子的断裂，B错误；图2析出得到的白色丝状物主要成分是DNA，DNA在NaCl溶液中的溶解度是随着NaCl的浓度变化而改变的，不是只能溶于2mol/L的NaCl溶液中，C错误。

例2如表关于DNA粗提取与鉴定实验的叙述，不正确的是()

选项

试剂

操作

作用

A

研磨液

与生物材料混合

提取溶解DNA

B

2mol/LNaCl溶液

与提取出的DNA混合

溶解DNA

C

冷却的酒精

加入到离心后的上清液中

溶解DNA

D

二苯胺试剂

加入到溶解有DNA的NaCl溶液中

鉴定DNA

答案C

解析DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质溶于酒精，利用这一原理可以初步分离DNA与蛋白质，C错误。

1．(2023·广东，11)“DNA的粗提取与鉴定”实验的基本过程：裂解→分离→沉淀→鉴定。下列叙述错误的是()

A．裂解：使细胞破裂释放出DNA等物质

B．分离：可去除混合物中的多糖、蛋白质等

C．沉淀：可反复多次以提高DNA的纯度

D．鉴定：加入二苯胺试剂后即呈现蓝色

答案D

解析裂解是使细胞破裂释放出DNA等物质，针对不同的实验材料，可选择不同的方法破坏细胞，如植物细胞可选择研磨的方法，而动物细胞可选择吸水涨破的方法，A正确；DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，它能溶于2mol/L的NaCl溶液，将溶液过滤，即可将混合物中的多糖、蛋白质等与DNA分离，B正确；DNA不溶于酒精，但某些蛋白质溶于酒精，利用这一原理可以反复多次用酒精沉淀出DNA，提高DNA的纯度，C正确；将DNA溶于NaCl溶液中，加入二苯胺试剂，沸水中加热五分钟，待冷却后，溶液能呈现蓝色，D错误。

2．下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，错误的是()

A．酵母菌和菜花均可作为提取DNA的材料

B．DNA既溶于2mol/LNaCl溶液也溶于蒸馏水

C．DNA的粗提取与鉴定实验中，需要使用体积分数95%的冷酒精

D．向洋葱研磨液的上清液中加蒸馏水搅拌，可见玻璃棒上有白色丝状物

答案D

解析DNA既溶于2mol/LNaCl溶液也溶于蒸馏水，B正确；向洋葱研磨液的上清液中加预冷的酒精溶液(体积分数为95%)搅拌，可见玻璃棒上有白色丝状物，D错误。

3．(2022·山东，13)关于“DNA的粗提取与鉴定”实验，下列说法错误的是()

A．过滤液沉淀过程在4℃冰箱中进行是为了防止DNA降解

B．离心研磨液是为了加速DNA的沉淀

C．在一定温度下，DNA遇二苯胺试剂呈现蓝色

D．粗提取的DNA中可能含有蛋白质

答案B

解析低温时DNA酶的活性较低，过滤液沉淀过程在4℃冰箱中进行是为了防止DNA降解，A正确；离心研磨液是为了使细胞碎片沉淀，B错误；在沸水浴条件下，DNA遇二苯胺试剂呈现蓝色，C正确；细胞中的某些蛋白质可以溶解于酒精，可能有蛋白质不溶于酒精，在95%的冷酒精中与DNA一块析出，故粗提取的DNA中可能含有