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重点突破练(三)[分值:100分]
第1~10题,每题4分;第11~12题,每题5分,共50分。
题组一基因工程的工具
1.1972年,伯格首先在体外进行了DNA改造的研究,成功地构建了第一个体外重组DNA分子。下列相关叙述正确的是()
A.不同的DNA分子必须用同一种限制酶切割,才能产生相同的黏性末端
B.DNA连接酶、DNA聚合酶、RNA聚合酶和逆转录酶都能催化形成磷酸二酯键
C.当限制酶在它识别序列的中心轴线两侧将DNA的两条链分别切开时,产生的是平末端
D.限制酶和DNA连接酶的作用部位不同
答案B
解析有些限制酶的识别序列不同,但可以产生相同的黏性末端,A错误;当限制酶在它识别序列的中心轴线两侧将DNA的两条链分别切开时,产生的是黏性末端,C错误;限制酶和DNA连接酶的作用部位相同,都是磷酸二酯键,D错误。
2.(2023·南京高二期末)限制酶a和b的识别序列与切割位点如图所示。下列叙述正确的是()
A.相同DNA分子被a酶切割的概率一般高于b酶
B.a酶、b酶均能切割氢键和磷酸二酯键
C.能被a酶识别并切割的序列也能被b酶切割
D.基因工程中同时用a酶、b酶两种酶切割质粒能防止其自身环化
答案A
解析限制酶识别序列越短,则该序列在DNA分子中出现的概率就越大,故相同DNA分子被a酶切割的概率一般高于b酶,A正确;a酶与b酶切断的化学键相同,都是磷酸二酯键,B错误;a酶的识别序列是-GATC-,b酶识别序列是-GGATCC-,能被b酶识别并切割的序列也能被a酶切割,但能被a酶识别并切割的序列不一定能被b酶切割,C错误;为防止限制酶切割后的质粒自身环化,在基因工程中通常使用能切出不同黏性末端的两种限制酶切割同一质粒,而a酶、b酶切割产生相同的黏性末端,D错误。
3.质粒是基因工程中常用的目的基因运载工具。下列有关叙述正确的是()
A.质粒上的抗性基因常作为标记基因供重组DNA的筛选
B.天然质粒均可以直接作为载体将目的基因送入受体细胞
C.在所有的质粒上都能找到一个至多个限制酶切割位点
D.携带目的基因的重组质粒只有整合到宿主细胞的染色体DNA上才会随后者的复制而复制
答案A
解析天然质粒往往不能直接作为载体,要根据不同的目的和需求进行人工改造后再使用,B错误;并不是所有的质粒都能作为载体,所以也不是在所有的质粒上总能找到一个至多个限制酶切割位点,C错误;携带目的基因的重组质粒进入受体细胞后,能在受体细胞中进行自我复制,或整合到受体细胞染色体DNA上,随受体细胞染色体DNA同步复制,D错误。
4.若要利用某目的基因(图甲)和P1噬菌体载体(图乙)构建重组DNA(图丙),限制性内切核酸酶的酶切位点分别是BglⅡ(A↓GATCT)、EcoRⅠ(G↓AATTC)和Sau3AⅠ(↓GATC)。下列分析正确的是()
A.用EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体
B.用BglⅡ和EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体
C.用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体
D.用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体
答案D
解析解答本题的关键是要看清切割后目的基因插入的方向,只有用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体,才能保证构建的重组DNA中RNA聚合酶在插入的目的基因上的移动方向与图丙相同。
5.(多选)如图是利用基因工程技术生产疫苗的部分过程,其中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ为四种限制性内切核酸酶。下列有关说法正确的是()
A.图示过程是基因工程的核心步骤,所需的限制性内切核酸酶一般来自原核生物
B.图示中构建基因表达载体时,需用到EcoRⅠ、SmaⅠ两种限制性内切核酸酶
C.一种限制性内切核酸酶只能识别一种特定的核糖核苷酸序列并在特定的位点切割
D.卡那霉素抗性基因的存在有利于将含有抗原基因的细胞筛选出来
答案AD
解析图示表示基因表达载体的构建过程,这是基因工程的核心步骤,所需的限制性内切核酸酶一般来自原核生物,A正确;由于SmaⅠ的识别序列位于目的基因上,若使用该限制性内切核酸酶,将破坏目的基因,所以此表达载体构建时需要用到EcoRⅠ、PstⅠ两种限制性内切核酸酶,B错误;限制性内切核酸酶具有特异性,即一种限制性内切核酸酶只能识别某种特定的脱氧核苷酸序列并在特定的位点切割,C错误;卡那霉素抗性基因作为标记基因,主要作用是筛选含有目的基因的受体细胞,D正确。
题组二基因工程的基本操作程序及应用
6.(2023·盐城高二期末)下列关于基因工程技术的叙述,正确的是()
A.当限制酶在它识别序列的中心轴线处切开时,产生的是黏性末端
B.用于PCR的引物长度通常为10~20个核苷酸
C.载体质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因
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