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主干知识排查
一、传统发酵技术的应用
1.直接利用原材料中天然存在的微生物,或利用前一次发酵保存下来的面团、卤汁等发酵物中的微生物进行发酵、制作食品的技术,称为传统发酵技术。传统发酵以混合菌种的固体发酵及半固体发酵为主,通常是家庭式或作坊式的。
2.腐乳制作的原理:豆腐中的蛋白质被分解成小分子的肽和氨基酸,味道鲜美,易于消化吸收。多种微生物参与了豆腐的发酵,如酵母、曲霉和毛霉等,其中起主要作用的是毛霉。
3.果酒制作的三个方面(以葡萄酒为例)
(1)菌种的来源:酒精发酵的菌种来自附着在葡萄皮上的野生型酵母菌。
(2)发酵的原理:酵母菌在有氧条件下进行有氧呼吸并进行大量繁殖,在无氧条件下进行无氧呼吸产生酒精。
(3)酒精的检测:在酸性条件下,重铬酸钾可与酒精反应呈现灰绿色。
4.醋酸菌是好氧细菌,当O2、糖源都充足时能通过复杂的化学反应将糖分解成乙酸;当缺少糖源时则直接将乙醇转化为乙醛,再将乙醛变为乙酸。
5.若将果酒制作成果醋,需要改变的环境条件是通入无菌空气和将温度提高到30~35℃。
6.制作传统泡菜利用了植物表面天然的乳酸菌来进行发酵,也可加入“陈泡菜水”,其目的是接种乳酸菌(增加发酵菌种数量),加快发酵进程。
7.制作泡菜时,向泡菜坛的坛盖边沿的水槽中注满水,目的是创造无氧环境。
8.影响泡菜中亚硝酸盐含量的因素包括温度、腌制时间、食盐用量等。泡菜制作过程中,温度过高、食盐用量过低、腌制时间过短等容易造成细菌大量繁殖,亚硝酸盐含量增加。
二、微生物的培养技术及应用
1.培养基的化学成分包括水、无机盐、碳源、氮源等。在提供上述几种主要营养物质的基础上,培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及O2的需求。例如,在培养乳酸杆菌时,需要在培养基中添加维生素;在培养霉菌时,一般需要将培养基调至酸性;在培养细菌时,一般需要将培养基调至中性或弱碱性;在培养厌氧微生物时,需要提供无氧的条件。
2.培养基的种类:按照物理性质可分为液体培养基、固体培养基、半固体培养基。按照功能用途可分为选择培养基、鉴别培养基等。
3.获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染。
4.消毒指使用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部一部分微生物。灭菌指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子。
5.对于一些不耐高温的液体,如牛奶,可使用巴氏消毒法。人们常使用化学药物进行消毒,如用酒精擦拭双手、用氯气消毒水源等。此外,接种室、接种箱或超净工作台在使用前,可以用紫外线消毒。在照射前,适量喷洒苯酚或煤酚皂溶液等消毒液,可以加强消毒效果。
6.培养基灭菌常采用湿热灭菌法,培养皿灭菌常采用干热灭菌法,接种环和涂布器灭菌常采用灼烧灭菌法。
7.菌落是指分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体。采用平板划线法和稀释涂布平板法能将单个微生物分散在固体培养基上,之后经培养得到的单菌落一般是由单个微生物繁殖形成的纯培养物。
8.平板划线操作的第一步是灼烧接种环,目的是避免接种环上可能存在的微生物污染培养物;每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后,接种环上残留的菌种,使下一次划线时,接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端,从而通过划线次数的增加,使每次划线时菌种的数目逐渐减少,以便得到单菌落。划线结束后灼烧接种环,目的是及时杀死接种环上残留的菌种,避免微生物污染环境和感染操作者。
9.在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基,称为选择培养基。
10.稀释涂布平板法不仅是分离和纯化微生物的重要方法,也是测定微生物数量的重要方法。该方法通过统计平板上的菌落数来推测样品中的活菌数,其原理是当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个单菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌。
11.稀释涂布平板法的计数原则:一般选择菌落数为30~300的平板进行计数。样品的稀释度将直接影响平板上的菌落数目,通常选用一定稀释范围的样品液进行培养。在同一稀释度下,应至少对3个平板进行重复计数,然后求出平均值。
12.平板划线法可用于分离纯化菌种,获得单菌落,但不能进行微生物计数。
13.一般来说,在一定的培养条件下(相同的培养基、温度及培养时间),同种微生物表现出稳定的菌落特征。这些特征包括菌落的形状、大小和颜色等方面。
14.土壤中分解尿素的细菌的分离与鉴定
(1)尿素分解菌的筛选:以尿素为唯一氮源的选择培养基可以筛选能分解尿素的细菌。
(2)尿素分解菌的鉴别:在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂,接种并培养初步筛选的菌种,若菌落周围出现红色环带,则可说明该菌种能够分解尿素。
三、发酵工程及其应用
1.发酵工程一般包括菌种的选育、扩大培养、培养基的配制、灭菌、接种
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