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第2节动物细胞工程
第1课时动物细胞培养
课标内容(1)阐明动物细胞培养的条件和过程。
(2)简述干细胞在生物医学工程中有广泛的应用价值。
知识点1动物细胞培养的条件和过程
1.动物细胞工程常用技术
(1)常用技术:动物细胞培养、动物细胞融合和动物细胞核移植等。
(2)基础:动物细胞培养。
2.动物细胞培养
(1)概念:从动物体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后在适宜的培养条件下,让这些细胞生长和增殖的技术。
(2)条件
提醒:合成培养基中加血清的原因:血清中含有多种未知的促细胞生长因子及其他活性物质,可以补充合成培养基中缺乏的物质。
(3)过程
提醒正常细胞在培养瓶的瓶壁上形成的是单层细胞;癌细胞没有接触抑制现象,可以在培养瓶壁上形成多层细胞。
知识点2干细胞培养及其应用
1.种类及存在部位
2.应用
(1)可以用于治疗人类的某些顽症:如神经干细胞在治疗神经组织损伤和神经系统退行性疾病(如帕金森病、阿尔茨海默病等)方面有重要的应用价值。
(2)诱导多能干细胞(iPS细胞):诱导过程无须破坏胚胎,而且iPS细胞可以来源于病人自身的体细胞,将它移植回病人体内后,理论上可以避免免疫排斥反应。
(1)多数动物细胞培养过程中其培养液所需的适宜pH为6.8~7.0。(×)
提示:多数动物细胞培养过程中其培养液所需的适宜pH为7.2~7.4。
(2)动物细胞培养要定期更换培养液,其目的是便于清除代谢物,防止代谢物积累对细胞自身造成伤害。(√)
(3)动物细胞培养技术的原理是动物细胞的全能性。(×)
提示:动物细胞培养技术的原理是细胞增殖。
(4)制备肝细胞悬液时先用剪刀剪碎肝组织,再用胃蛋白酶处理。(×)
提示:应该用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理。
(5)培养动物细胞的第一代(即第一次细胞增殖)被称为原代培养。(×)
提示:原代培养指动物组织经处理后的初次培养。
(6)胚胎干细胞和成体干细胞都具有形成机体的所有组织和器官,甚至个体的潜能。(×)
提示:成体干细胞具有组织特异性,只能分化成特定的细胞或组织,不具有发育成完整个体的能力。
一、动物细胞培养的条件和过程
【情境探疑】
完善有关动物细胞培养示意图,并回答问题:
(1)幼龄动物的细胞与老龄动物的细胞比较,分化程度低的细胞与分化程度高的细胞比较,哪些细胞更易于培养?为什么?
提示:幼龄动物的细胞和分化程度低的细胞更易培养,原因是这些细胞分裂能力强。
(2)进行动物细胞传代培养时用胰蛋白酶分散细胞,说明细胞间的物质主要是什么?用胃蛋白酶可以吗?为什么?
提示:蛋白质。不可以。多数动物细胞生存的适宜pH为7.2~7.4,胃蛋白酶(适宜pH为1.5左右)在此环境中没有活性,而胰蛋白酶在此环境中活性较高,因此胰蛋白酶适用于细胞培养时的处理。
(3)动物细胞培养过程中有接触抑制现象,这一现象说明了细胞膜具有什么功能?细胞膜接受信息后,细胞停止分裂又说明了什么?
提示:细胞培养过程中的接触抑制说明了细胞膜能进行细胞间的信息交流。细胞膜接受信息后,细胞停止分裂,说明了细胞膜接受的信息能够传递到细胞核。
(4)为什么动物细胞培养中有贴壁生长的特性?
提示:动物细胞膜上有糖蛋白,使细胞具有黏着性。
(5)动物细胞培养要经过脱分化的过程吗?为什么?
提示:不需要。因为动物细胞培养是为了培养出大量的细胞,而不是把单个或少量细胞培养成器官或生物个体。
1.动物细胞培养过程中“两次”使用胰蛋白酶的作用
(1)第一次:用胰蛋白酶处理动物组织,目的是把组织分散为单个细胞后进行培养,即原代培养。
(2)第二次:细胞培养过程中出现接触抑制,用胰蛋白酶处理使其从瓶壁上脱离下来,然后将其分散到多个培养瓶中继续进行培养,即传代培养。
2.原代培养与传代培养
(1)原代培养:细胞悬液第一次在培养瓶中培养,分瓶之前的细胞培养,即动物组织经处理后的初次培养。
(2)传代培养:贴满瓶壁的细胞需要重新用胰蛋白酶等处理,然后分瓶继续培养,让细胞继续增殖,这样的培养过程通常被称为传代培养。10代以内的细胞可保持正常的二倍体核型。细胞传至10~50代左右时,会出现核型异常,细胞增殖会明显减缓,甚至完全停止。当继续传代培养时,少部分细胞会克服细胞寿命的自然极限,获得不死性。
3.动物细胞培养和植物组织培养的比较
【典例应用】
例1对某种动物的肝肿瘤细胞进行细胞培养,下列说法错误的是()
A.在利用肝组织块制备细胞悬液时,可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理
B.细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行,CO2的作用是刺激细胞呼吸
C.选择幼龄动物的组织细胞更易于培养
D.在合成培养基中,通常需加入血清等天然成分
答案B
解析在利用肝组织块制备细胞悬液时,可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理,以分解组织细胞间的蛋白质,得到单个细胞,
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