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影响免疫组化染色的因素及对策良好的免疫组化染色切片是正确判断染色结果的基础和前提。由于免疫组化染色过程中存在很多步骤或环节，每一个步骤或环节都可能影响到染色的最终结果，因此，要做好一张高质量的免疫组化切片并不是一件非常容易的事。需要病理技术员和病理医生密切配合、相互协调、共同努力才能保证做出合格的免疫组化切片。一、影响免疫组化染色质量的因素标本的固定手术标本的及时固定是保证免疫组化染色质量的关键。未能及时固定的组织，会造成细胞的变性和自溶，导致结构的破坏和抗原物质的弥散，在免疫组化染色上表现为抗原定位的变化和背景染色的增高。过度的固定会造成抗原决定簇的封闭和抗原的丢失。同一病例的ER表达情况ER01ER02固定不及时03固定二周后取材04固定8小时后取材05未及时固定的乳腺癌组织ER表达胞浆着色切片质量的影响切片太厚、皱褶，刀痕，敷贴不牢固，以及脱蜡不彻底，均会影响免疫组化的染色质量，易出现非特异性染色和染色不均匀。抗原修复环节的影响抗原修复环节在免疫组化染色中是极为重要的环节。不同的修复时间、不同的修复方法、不同的抗原修复液，最终的结果会有差异。同一蜡块不同修复方式的结果ER壹贰Her-2(2+)叁Her-2(1+)肆微波修复伍水浴修复同一蜡块不同修复时间的结果同一蜡块使用不同修复液的结果Ki-67EDTA柠檬酸操作过程中细节问题的影响滴加抗体未完全覆盖组织，PBS残留过多，操作过程中切片干燥等原因，会出现边缘效应和染色不均匀及北京染色等。抗体覆盖组织不完全造成的边缘效应抗体覆盖不均匀的灶状着色影响免疫组化染色质量的因素第一抗体、检测系统的影响使用不同克隆、不同种属来源的抗体，不同的检测系统，免疫组化的染色会产生差异。使用三步法试剂盒（如SP法）生物素系统进行免疫组化染色时，如果操作不当会产生较强的背景染色。影响免疫组化染色质量的因素显色剂、复染剂的影响苏木素复染过深、过浅，对比都不清晰。不同的DAB显色试剂盒、不同的显色时间，会对免疫组化染色强度及级别判断产生影响。DAB显色恰当GST-πDAB显色恰当logoCK5/6Ki-67”胸腔积液离心包埋细胞块的免疫组化染色TTF-1CK7logoCalponinTOPOⅡCK5/6P63
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