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选择性必修3;1.细胞工程的概念;2.细胞工程分类;1902年:哈伯兰特提出细胞全能性的理论,但相关实验尝试没有成功。;动物细胞工程的发展历程;本节聚焦:
植物细胞工程的理论基础是什么?
什么是植物组织培养技术和植物体细胞杂交技术?
怎样进行菊花的组织培养?;“其茅葺,其叶青青,犹绿衣郎,挺节独立,可敬可慕。迨(dài)夫花开,凝情瀼露,万态千妍,薰风自来,四坐芬郁,岂非真兰室乎!岂非有国香乎!”
——《金漳兰谱》;一、植物组织培养技术;细胞全能性实例:;一、植物组织培养技术;一、植物组织培养技术;;愈伤组织的细胞排列疏松而无规则是一种高度液泡化的无定形状态的细胞。愈伤组织形成以后,如果在原来的培养基上续培养,就会由于培养基中养分不足或有毒代谢产物的,导致愈伤组织生长停止,甚至老化变黑乃至死亡。如果要愈伤组织续生长增殖,必须定期地将它们分成小,接种到新鲜的培养基上,这样愈伤组织就可以长期保持旺盛的生长。愈伤组织的再分化主要有两种方式。一种是不定芽方式,就是在某些条件下,愈伤组织的细胞发生分化,形成不同的器官原基,再逐渐形成芽和根(图1-2-8)。另一种是胚状体方式,就是由愈伤组织诱导分化出的具有胚芽、胚根、胚轴的类似于胚的结构。能够产生胚状体的愈伤组织常见于胡萝卜、芦笋、玉米和小麦等植物。;;7.影响植物组织再分化的因素有:
①生长素和细胞分裂素的比值②微生物
③培养基的离子平衡④pH值⑤温度;菊花的组织培养;(1)了解植物组织培养的基本原理
(2)了解生长素和细胞分裂素的浓度、用量比例对菊花愈伤组织形成和分化的影响。
(3)尝试进行植物组织培养;菊花的组织培养;;菊花的组织培养;菊花的组织培养;菊花的组织培养;菊花的组织培养;菊花的组织培养;幼苗;菊花的组织培养;思考:
1.为什么整个过程要保证无菌操作?
2.为什么外植体不能倒插?
;脱分化
将接种了外植体的锥形瓶或植物组织培养瓶置于18-22℃的培养箱中培养。在培养过程中,定期观察和记录愈伤组织的生长情况。;再分化
;菊花的组织培养;菊花的组织培养;避免杂菌在培养基上迅速生长消耗营养,同时防止有些杂菌危害培养物的生长。;菊花的组织培养;植物组织培养中细胞表现出全能性的条件
(1)离体(最关键)
(2)严格的无菌条件
(3)适宜的培养条件
(4)适宜浓度和比例的激素
(5)一定的营养条件;特殊的植物组织培养——花药离体培养;二、植物体细胞杂交技术;二、植物体细胞杂交技术;二、植物体细胞杂交技术;二、植物体细胞杂交技术;6.植物体细胞杂交的方法
(1)化学法和物理法(原生质体融合用这两种方法)
化学法:聚乙二醇
优点:使用方便,诱导细胞融合的频率高
缺点:有一定的毒性对某些细胞不适用(如卵细胞)
物理法:电刺激、离心等
优点:诱导细胞融合的频率高、对细胞无毒害作用、
操作简便、可重复性好,诱导过程可控性强。;;比较“植物组织培养”与“植物体细胞杂交”;概念;练习与应用;练习与应用;
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