T_SXSF 18-2025 软枣猕猴桃组织培养技术规程.docxVIP

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SXSF

团体标准

T/SXSF18-2025

软枣猕猴桃组织培养技术规程

2024-12-30发布2024-12-30实施

山西省林学会发布

I

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目次

前言 II

1范围 1

2规范性引用文件 1

3术语和定义 1

4外植体采集与消毒 1

5初代培养 1

6继代培养 2

7生根培养 2

8炼苗与移栽 2

9苗期管理 3

10档案管理 3

附录A（资料性）MS基本培养基 4

II

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前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

本文件由山西省林学会提出并监督管理。

本文件由山西省林学会团本标准化技术委员会归口。

本文件起草单位：山西省林业生态实验基地。

本文件主要起草人：郭晓霄、王小华、马倩、郭晓雯、成允海、李志刚、李朋、刘璐、刘捷、王敏、杜雁梅。

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软枣猕猴桃组织培养技术规程

1范围

本文件确立了软枣猕猴桃（Actinidiaarguta(Sieb.etZucc.)Planch.exMiq.）组织培养程序，规定了软枣猕猴桃组织培养的外植体采集与消毒、初代培养、继代培养、生根培养、炼苗与移栽、苗期管理和档案管理等。

本文件适用于软枣猕猴桃组培苗的生产。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

LY/T2289林木种苗生产经营档案

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4外植体采集与消毒

4.1采集

春季选择生长健壮、无病虫害的当年生幼嫩枝条。

4.2清洗

将枝条剪去叶片，切成3cm～5cm带腋芽茎段，两端距芽≥1cm，用肥皂水浸泡5min～10min，再用自来水流动冲洗30min。

4.3消毒

在超净工作台上，将清洗后的茎段放入浓度为75%的酒精中浸泡20s，无菌水冲洗3次，每次3min；再用0.1%HgCl2溶液浸泡5min～6min，无菌水冲洗5次，每次3min；用无菌滤纸吸干表面水分备用。

5初代培养

5.1配制培养基

MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L，pH5.8～6.0，在121℃下灭菌15min～30min。MS基本培养基配方见附录A。

5.2接种

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在超净工作台，用无菌刀片切去茎段两端灭菌失活的部分，接入初代培养基中，每瓶1个。

5.3培养

放入温度23℃~25℃、相对空气湿度20%～30%、光照强度2000lx～2200lx、光照时间12h/d的培养室中培养。

6继代培养

6.1配制培养基

MS+6-BA0.5mg/L+ZT1.0mg/L，pH5.8～6.0，在121℃下灭菌15min～30min。

6.2接种

将初代培养萌发的无菌短枝接入培养基中，每瓶接种5～6株。

6.3培养

培养条件同5.3，培养20d～30d后将丛生芽切分后继续转接，反复继代培养。

7生根培养

7.1配制培养基

1/2MS+IBA0.2mg/L，pH5.8～6.0，在121℃下灭菌15min～30min。

7.2接种

选取生长健壮、高2cm～2.5cm的丛生芽切分为单株，接种至生根培养基中，每瓶6～8株。

7.3培养

培养条件同5.3，诱导分化生根，直至移植。

8炼苗与移栽

8.1炼苗

当苗高≥3.0cm，根长在0.5cm～1.5cm时，将试管苗转移到日光温室中，在自然光照下炼苗，温度控制在25℃左右，封口炼苗3d～5d，开口炼苗3d～5d。

8.2移栽

8.2.1基质准备

基质采用蛭石、泥炭土2:3的比例混合。移栽前用0.3%～0.5%高锰酸钾溶液喷洒基质。

8.2.2栽植

阴天下午，洗净试管苗根部培养基，栽植到基质中，放到温室苗床培养。

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9苗期管理

初期温度控制在20℃~25℃,空气湿度≥85%，适度遮