微生物的培养与应用真题.pdfVIP

2022年高考生物总复习：微生物的培养与应用

1.(2016·全国课标卷Ⅲ，39)某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料分离纯化乳酸菌。

分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸能溶解培

养基中的碳酸钙。回答下列问题：

(1)分离纯化乳酸菌时，首先需要用________对泡菜滤液进行梯度稀释，进行梯

度稀释的理由是________。

(2)推测在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用有________和________。

分离纯化时应挑选出________的菌落作为候选菌。

(3)乳酸菌在－20℃长期保存时，菌液中常需要加入一定量的________(填“蒸馏

水”、“甘油”或“碳酸钙”)。

解析(1)分离纯化乳酸菌时，首先需要用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释；进

行梯度稀释的理由是在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的乳酸菌将被分散成

单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。(2)在分离纯化所用的培养

中加入碳酸钙的作用有中和乳酸菌代谢过程中产生的乳酸和利于乳酸菌的识别

和分离；分离纯化时应挑选出在平板上有透明圈的菌落作为候选菌。(3)乳酸菌

在－20℃长期保存时应使用甘油管藏法，故菌液中常需要加入一定量的甘油。

答案(1)无菌水泡菜滤液中菌的浓度高，直接培养很难分离得到单菌落

(2)鉴别乳酸菌中和产生的乳酸(或酸)具有透明圈

(3)甘油

2.(2015·全国卷Ⅰ，39)已知微生物A可以产生油脂，微生物B可以产生脂肪酶。

脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产。回答有关问题：

(1)显微观察时，微生物A菌体中的油脂通常可用______________染色。微生物

A产生的油脂不易挥发，可选用________(填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”)从

菌体中提取。

(2)为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落，可从含有油料作物

种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以________为碳源的固体培养基进行培养。

(3)若要测定培养液中微生物B的菌体数，可在显微镜下用____________________

直接计数；若要测定其活菌数量，可选用____________________法进行计数。

(4)为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在35℃、

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40℃、45℃温度下降解10g油脂所需酶量依次为4mg、1mg、6mg，则上述三

个温度中，________℃条件下该酶活力最小。为了进一步确定该酶的最适温度，

应围绕________℃设计后续实验。

解析(1)生物组织中的油脂能被苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ)染成橘黄色(或红色)。(2)为了

筛选出能产生脂肪酶的微生物B的单菌落，我们应选用只能让该菌落生长的选

择性培养基，因此培养基中只能选用油脂作为唯一碳源的固体培养基。(3)血细

胞计数板可用于直接计数培养液中的菌体数，但是不分死活，因此要计数活菌数

量要通过稀释涂布平板法来计数。(4)温度影响酶的活性，在三个温度中，45℃

需酶量最高，说明酶活性最低；在三个温度实验中40℃所需酶量最少，低于35℃

和45℃所用酶量，说明酶的最适温度介于35℃和45℃之间，因此应围绕40℃

设计不同温度梯度，进行后续实验。

答案(1)苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ)萃取法

(2)油脂

(3)血细胞计数板稀释涂布平板

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