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2022年高考生物总复习：微生物的筛选和计数
1.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
项目详细内容
(1)能合成脲酶的细菌才能分解尿素
实验原理(2)配制以尿素为唯一氮源的培养基，能够生长的细菌就是能分解尿
素的细菌
(1)直接计数法(显微镜下用特定细菌计数板或血细胞计数板)
数量统计
(2)间接计数法：稀释涂布平板法
土壤取样→配制土壤溶液和制备培养基→系列稀释→涂布平板与培
实验流程
养→菌落计数
2.分解纤维素的微生物的分离
(1)纤维素酶
①组成：纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，C酶、Cx
1
酶和葡萄糖苷酶。
②作用
C酶葡萄糖苷酶
纤维素――→纤维二糖――→葡萄糖1
Cx酶
(2)纤维素分解菌的筛选
①原理
纤维素分解菌
↓
刚果红纤维素酶
→红色复合物――→红色消失，出现透明圈
纤维素
②筛选方法：刚果红染色法，即通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。
③培养基：以纤维素为唯一碳源的选择培养基。
④实验流程
土壤取样：富含纤维素的环境
↓
选择培养：用选择培养基培养，以增加纤维素分解菌的浓度
↓
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梯度稀释：制备系列稀释液
↓
涂布平板：将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上
↓
挑选产生透明圈的菌落
(3)分离纤维素分解菌所用的两种培养基比较
分离纤维素分解菌的实验中先用选择培养基，再用鉴别培养基。
①选择培养基为液体培养基，以纤维素作为碳源和能源的微生物可以正常生长，
而其他绝大多数微生物不能正常生长。
②鉴别培养基含琼脂，为固体培养基，细菌可在培养基上形成肉眼可见的菌落。
刚果红染色法应用的就是鉴别培养基。
3.结果分析与评价
内容现象结论
对照的培养皿中无菌落生长未被杂菌污染
有无杂菌污染的
培养物中菌落数偏高被杂菌污染
判断
菌落形态多样，菌落数偏高培养物中混入
其他氮源选择培牛肉膏培养基上的菌落数目大于
选择培养基具筛选作用
养基的筛选作用选择培养基上的数目
得到2个或2个以上菌落数目在
样品的稀释操作操作成功
30～300的平板
重复组的结果若选取同一种土样，统计结果应接近
1.(2016·四川卷，10)图甲是从土壤中筛选产脲酶细菌的过程，图乙是脲酶基因转
录的mRNA部分序列。
第2页共5页
(1)图中选择培养基应以________为唯一氮源；鉴别培养基还需添加________作
指示剂，产脲酶细菌在该培养基上生长一段时间后，其菌落周围的指示剂将变成
________色。
5
(2)在5个细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为10的土壤样品液0.1mL
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