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ICS11.220
B41
备案号：34651-2012DB44
东
方
广标准
省地
DB44/T1018-2012
鱼类血液非特异性免疫指标检测技术
Techniquesfornon-specificimmuneindexesanalysisoffishblood
2012-06-04发布2012-09-15实施
广东省质量技术监督局发布
0844/T1018-2012
刚吕
本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。
本标准由广东省海洋与渔业局提出。
本标准由广东省水产标准化技术委员会归口。
本标准起草单位：中国水产科学研究院南海水产研究所、咸阳师范学院、武汉工业学院、西北农
林科技大学、中国人民解放军第八一医院、陕西科技大学。
本标准主要起草人：王文博、李明、凌飞、鲍炜、赵敏婷。
0844/T1018-2012
鱼类血液非特异性免疫指标检测技术
1范围
本标准规定了鱼类血样的采集、血液非特异性免疫指标的检测项目和检测方法的要求。
本标准适用于鱼体的血液非特异性免疫指标检测，其他水产养成品可参照执行。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本
文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所高的修改单）适用于本文件。
SC/T7014水生动物检疫实验技术规范
SC/T7201.1鱼类细菌病检疫技术规程
3血样的采集
3.1随机取一定数量的活体或刚死不久的材料鱼，对采样的数量和个体要求按SC/T7014的规定执行。
3.2将鱼迅速捞入浓度为200mg/L的间氨基苯甲酸乙醋甲硝酸盐CMS-222）中做0.5min~1min
的快速深度麻醉，之后用无菌注射器于尾静脉抽血。
3.3每份血样分为两份，一份以肝素抗凝，另一份以3000r/min转速在4℃下离心10min，获得血
清，置4℃冰箱备用，尽早检测，放置时间不超过一周。
4检测项目
血液溶菌酶活性、血液杀菌活性、血液白细胞吞噬活性、血液白细胞压积、血液红细胞压积、血
液淋巴细胞计数。
5检测方法
对检测中用到的试剂和器械设备按SC/T7201.1中第1部分通用技术规定准备。
5.1血液溶菌酶活性检测
按分光光度计法进行，测定波长为540m。用0.5%NaCl溶液配制浓度为0.2mg/mL的溶壁微球菌
（的crocococcusJysodeikticus）菌液。取5盹血清加入3mL菌液中，反应0.5min后记录吸光值001.
4.5min后记录吸光值002，以lmin内吸光值下降0.001为1个活性单位（U），按公式(1）计算。
每毫升活性单位数（U)=[COD1-0D2)I(4×0.001×5)J×I000…….(1)
5.2血液杀菌活性检测
在无菌条件下，用0.5%NaCl溶液将河弧菌（盯brofluvialis）配成106个／mL的菌悬液
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