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微生物的选择技术与培养
【从社会中来】
自然界中微生物数量繁多,种类庞杂,要想从中分离出需要的特定微生
物并不容易,尤其当要分离的微生物在混合菌群中不是优势种群时,仅通过
一般的平板划线法或稀释涂布平板法很难实现。
如何从自然界中分离出需要的特定微生物?
一、选择培养基
1.科学实例:寻找耐高温的DNA聚合酶
Ø聚合酶链式反应(PCR)是一种在体外扩增DNA片段的技术,此项技术要
求使用耐高温(930C)的DNA聚合酶。
寻找寻找
耐高温的酶?耐高温生物体高温环境(热泉、火山口)
美国黄石公园
寻找目的菌种时要根据它对生存环境的要求,到相应的环境中去寻找。
2.实验室中微生物的筛选原理:
温泉冰川冻土层被石油污染的土壤
耐热微生物耐寒微生物石油分解菌
Ø实验室中微生物的筛选,也可以应用同样的原理:即人为提供有利于目的菌株
生长的条件(包括营养、温度、pH等),同时抑制或阻止其他微生物生长。
3.选择培养基:在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其
他种类微生物生长的培养基,称为选择培养基。
选择培养基类型
(1)改变培养条件。
70~80℃的高温分离耐高温的水生栖热菌
使用将pH调至酸性的培养基分离耐酸菌
(2)改变培养基中的营养成分。
不加碳源(含碳有机物)的培养基分离出自养型微生物
不加氮源的培养基分离出固氮菌
(3)添加某种化学物质。
加入青霉素分离酵母菌、霉菌等真菌
加入高浓度食盐的培养基分离得到金黄色葡萄球菌(耐盐)
选择培养基
培养基培养基+氨苄青霉素
怎样选择出抗氨苄青霉素能
力的细菌?
培养基中加氨苄青霉素
没有抗氨苄青霉素能力
的菌落被淘汰
长出各种各具有抗氨苄
样的细菌青霉素能力
的菌落
【思考·讨论】
尿素[CO(NH2)2]含氮量高,化学性质稳定,是现代农业
生产中一种重要的氮肥。尿素被土壤中某些细菌分解成NH3,再
-+
被转化为NO3、NH4等被植物吸收。这些细菌之所以能分解
尿素,是因为能合成脲酶,来催化尿素分解。
脲酶
CO(NH2)2+H202NH3+CO2
讨论1:如果让你配制一种培养基,将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来,
培养基的配方该如何设计?
在选择培养基中,用尿素作为唯一氮源,只有能合成脲酶的细菌才能生长发育繁殖。
讨论2:该培养基与普通培养基有哪些共同点和不同点?
培养基一①从物理性质来讲,两者属
牛肉膏5.0g于固体培养基;
蛋白胨10.0g
NaCl5.0g②从用途上来讲,培养基二属于选择培
琼脂20.0g养基,
蒸馏水定容到1000ml
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