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2、配制培养基分装到锥形瓶中,每瓶分装50ml或100ml①配制培养液②调PH③培养基的分装由于菊花的茎段的组织培养比较容易,因此不必添加植物激素3、灭菌分装好的培养基连同其他器械一起进行高压蒸汽灭菌第23页,共35页,星期日,2025年,2月5日1、选材:菊花茎段,取生长旺盛的嫩枝(二)外植体消毒2、消毒①流水冲洗菊花茎段用流水冲洗后可少许洗衣粉,用软刷轻轻刷洗,刷洗后在流水下冲洗20min左右②酒精处理用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分,放入体积分数为70%的酒精中摇动2-3次,持续6-7s,立即将外植体取出,在无菌水中清洗③消毒液处理取出后用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分,放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中1-2min,取出后在无菌水中至少清洗3次,漂净消毒液第24页,共35页,星期日,2025年,2月5日(三)接种污染的主要来源是空气中的细菌和孢子,接种室消毒是至关重要的。用70%的酒精喷雾使空气消毒,酒精或新洁尔灭搽洗工作台并用紫外线照射20分钟1、接种室消毒2、无菌操作要求操作要在酒精灯火焰旁完成,每次使用器械后,都需要用火焰灼烧灭菌,接种后立即盖好瓶盖。3、材料的切取和接种第25页,共35页,星期日,2025年,2月5日关于高中生物第三章第一节菊花的组织培养3新人教版选修1第1页,共35页,星期日,2025年,2月5日第2页,共35页,星期日,2025年,2月5日第3页,共35页,星期日,2025年,2月5日菊花是菊科菊属的多年生宿根草本植物,是我国的传统名花和世界四大切花之一长期以来菊花采用分株、扦插等无性繁殖方法进行繁殖但是传统的繁殖方法易受环境影响,繁殖周期长,随着市场需求的急剧增加,已经不能满足市场日益发展的需要。植物组织培养具有增殖效率高、繁殖速度快的特点,可以用较短的时间和较少的空间生产出大量的试管苗第4页,共35页,星期日,2025年,2月5日扦插嫁接压条第5页,共35页,星期日,2025年,2月5日植物组织培养的基本过程影响植物组织培养的因素菊花的组织培养第6页,共35页,星期日,2025年,2月5日植物组织培养关键词:外植体、脱分化、再分化、愈伤组织在无菌和人工控制条件下,将离体的植物器官、组织、细胞,培养在人工配置的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其产生愈伤组织、丛芽,最终形成完整的植株。第7页,共35页,星期日,2025年,2月5日切取形成层无菌接种诱导愈伤组织的形成试管苗的形成培养室移栽脱分化再分化举例第8页,共35页,星期日,2025年,2月5日1、培育无病毒植株2、大规模培养愈伤组织(提取紫草素,治疗烫伤和割伤的药物以及染料和化妆品的原料)4、基因工程中亦需用到植物组织培养的方法(受体细胞为植物细胞)植物组织培养的应用:3、人工种子(解决有些作物品种繁殖能力差,结子困难或发芽率低等问题)第9页,共35页,星期日,2025年,2月5日植物组织培养过程:离体组织或细胞植物体脱分化细胞分裂素≈生长素愈伤组织芽根细胞分裂素生长素细胞分裂素生长素再分化植物细胞培养不需要光需要光第10页,共35页,星期日,2025年,2月5日脱分化:让已经分化的细胞,经过诱导后,失去其特有的结构和功能而转变成未分化细胞的过程。再分化:脱分化的细胞,在一定的条件下,又重新分化成各种特异性的组织细胞的过程。外植体:离体的植物器官、组织或细胞。愈伤组织:细胞排列疏松、无规则、高度液泡化的无定形的薄壁细胞。第11页,共35页,星期日,2025年,2月5日植物组织培养的理论基础——细胞全能性概念:高度分化的植物细胞,仍然具有发育成完整个体的潜能。基础:生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质。表达条件:离体条件无菌操作适宜物质的诱导和调节(植物激素)适宜的营养物质温度、酸碱度、光照等条件的控制第12页,共35页,星期日,2025年,2月5日影响植物组织培养的因素材料的种类、年龄及保存时间长短等营养植物激素PH、温度、光照等条件第13页,共35页,星期日,2025年,2月5日(1)植物材料的选择烟草和胡萝卜的组织培养较为容易
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