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硅胶柱层析技术.pptVIP

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硅胶柱层析技术;;;柱层析;;;;;;;;;;;柱层析

;1、称量

200-300目硅胶,称30-70倍于上样量;如果极难分,也可以用100倍量的硅胶H。干硅胶的视密度在0.4左右,所以要称40g硅胶,用烧杯量100ml也可以。

2、搅成匀浆

参加干硅胶体积一倍的溶剂用玻璃棒充分搅拌。如果洗脱剂是石油醚/乙酸乙酯/丙酮体系,就用石油醚拌;如果洗脱剂是氯仿/醇体系,就用氯仿拌。如果不能搅成匀浆,说明溶剂中含水量太大,尤其是乙酸乙酯/丙酮,如果不与水配伍走分配色谱的话,必须预先用无水硫酸钠久置枯燥。氯仿用无水氯化钙枯燥,以除去1%的醇。如果样品对酸敏感,不能用氯仿体系过柱。;;;;TIPS:;柱子可以分为:加压,常压,减压。;关于柱子的尺寸;;关于湿法、干法上样;溶剂的选择;;关于操作问题;;;;;

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