《共沉淀免疫检测技术》课件.pptVIP

共沉淀免疫检测技术;目录;第一部分：引言;什么是共沉淀？;什么是免疫检测？;共沉淀免疫检测技术(Co-IP)的定义;Co-IP的发展历程;Co-IP的重要性及应用领域;第二部分：Co-IP的原理;蛋白质间的相互作用;共沉淀的原理：抗体-抗原反应;免疫检测的原理：标记和检测;Co-IP的基本流程图;实验流程详解：裂解细胞;实验流程详解：抗体孵育;实验流程详解：蛋白A/G琼脂糖珠;实验流程详解：洗涤;实验流程详解：洗脱;实验流程详解：WesternBlot检测;第三部分：Co-IP的实验设计;目标蛋白的确定;抗体的选择：单克隆vs.多克隆;细胞裂解液的选择;阴性对照的设置;阳性对照的设置;洗涤缓冲液的优化;洗脱条件的优化;实验结果的判断标准;第四部分：Co-IP的优化;背景信号的降低;非特异性结合的抑制;目标蛋白回收率的提高;蛋白降解的防止;抗体用量的调整;洗涤次数的优化;洗脱体积的控制;第五部分：Co-IP的应用;蛋白质相互作用的验证;新蛋白质相互作用的发现;信号通路的研究;蛋白质复合体的分析;药物靶点的筛选;疾病机制的探索;第六部分：Co-IP的高级应用;反向Co-IP;原生Co-IP;化学交联Co-IP;染色质免疫共沉淀(ChIP);RNA免疫共沉淀(RIP);第七部分：Co-IP的局限性;假阳性结果的产生;假阴性结果的产生;蛋白质相互作用的瞬时性;实验条件的限制;第八部分：Co-IP的注意事项;实验材料的准备;实验操作的规范性;实验数据的记录;实验结果的分析;实验安全