糖基转移酶和糖苷酶.pptVIP

许多软体动物也是糖苷酶的良好来源。糖苷酶在自然界有广泛分布，几乎所有动物、植物和微生物体内都能找到糖苷键。植物种子里有丰富的糖苷酶。在哺乳动物中，血清、血细胞、体液、各种组织器官中都有存在。一些细菌、酵母、霉菌的糖苷酶已有相当的研究报道。二、糖苷酶的分布糖苷酶的命名与它的底物专一性密切相关。1底物专一性包含：2糖基一侧的专一性；3糖苷键的?-?-异头专一性；4糖苷配基一侧的专一性。5糖苷酶的命名是根据糖基一侧的专一性和糖苷键的?-?-异头专一性来命名的。6?-葡萄糖苷酶、?-葡萄糖苷酶、?-半乳糖苷酶、?-甘露糖苷酶等。7三、糖苷酶的命名糖苷键的?-?-异头专一性糖基一侧的专一性糖基配基一侧的专一性分泌到细胞外的糖苷酶，参与营养物质的胞外消化吸收过程。细胞内的糖苷酶，如动物细胞内的溶酶体中有一系列糖苷酶，它们的功能是降解胞内的糖复合物。参与糖链的合成，如在糖蛋白生物合成过程中，参加N-型糖链的“剪枝”，“修剪”成较短分支(Man3GlcNAc-Asn)结构，然后再由糖基转移酶加上新的糖基，形成不同结构的糖链。四、糖苷酶的生物学功能BiologicalRolesofN-glycanaseinCells五、一些常见的糖苷酶?-D-甘露糖苷酶?-D-甘露糖苷酶?-D-木糖苷酶?,?-鼠李糖苷酶?-D-葡萄糖苷酶?-D-葡萄糖苷酶：海藻糖酶、淀粉葡萄糖苷酶、葡聚糖蔗糖酶、淀粉麦芽糖酶。唾液酸酶(神经氨酸酶类)。?-D-半乳糖苷酶?-D-半乳糖苷酶?-D-N-乙酰半乳糖胺酶?-D-N-乙酰己糖胺酶?-D-N-乙酰葡糖胺酶?-D-N-乙酰半乳糖胺酶?-D-岩澡塘苷酶?-L-岩澡塘苷酶一些常见的糖苷酶水解不同类型糖苷键的糖苷酶黄芪皂苷糖苷酶产生菌的筛选将筛选用菌株Absidasp.A9r、A84r、A9r、A8r、A38r、Arr进行培养制备酶液?以黄芪总皂苷为底物进行诱导?薄层层析法检测水解结果。结果：Absidasp.A3r菌所产酶液能较好的水解黄芪总皂苷中糖基较多的皂苷，进而生成糖基较少的皂苷。六、糖苷酶的制备方法绿色木霉产生的外切β-葡聚糖苷酶从潮湿的树皮及腐烂的木块上采集样本?加适量的无菌水温和搅拌?取1ml悬浊液,分别涂于含有滤纸的固体筛选培养基上?待长出若干菌落后，对生长良好的菌种进行分离?以羧甲基纤维素钠为底物分别测定其所产酶活性。菌培养液过滤?上清液硫酸铵沉淀?Sephadex柱层析?DEAE2纤维素52阴离子交换柱层析?收集洗脱纯酶液。123采用神经节苷脂选择性培养基，从土壤微生物中筛选得到一株产神经节苷脂内切糖苷酶的菌株YW2112，该酶能特异性水解神经节苷脂中连接神经酰胺和寡糖链之间的糖苷键，是研究神经节苷脂结构与功能的重要工具酶。一株神经节苷脂内切糖苷酶产生菌的分离010201人参糖苷酶提取目的：用于对人参皂苷进行改造的糖苷酶。方法：从鲜人参根中提取人参皂苷酶，乙醇沉淀，离子交换层析纯化，凝胶电泳分析，薄层色谱法测酶活力。结果：经离子交换层析得到人参皂苷?-葡糖苷酶。糖苷酶的分离、纯化和测定01糖苷酶的分离纯化，在原则和技术方法上和一般的蛋白质或酶的分离纯化没有区别。01常用的方法：盐析(硫酸铵沉淀)、柱层析(离子交换、凝胶过滤、亲和层析、吸附)，电泳等。01一些糖苷酶的分离纯化方法来源酶的名称方法刀豆粉?-甘露糖苷酶乙醇沉淀、凝胶过滤、离子交换?-N-乙酰己糖胺酶柱层析?-半乳糖苷酶无花果?-半乳糖苷酶丙酮沉淀、凝胶过滤、离子交换柱层析、等电聚胶产气夹膜梭菌?-N-乙酰葡糖胺酶?-N-乙酰半乳糖胺酶?-半乳糖苷酶硫酸铵沉淀、凝胶过滤、离子交换柱层析、制备电泳猪肾?-甘露糖苷酶硫酸铵沉淀、丙酮沉淀、热处理(60C，15分钟)、吸附柱层析、凝胶过滤、制备电泳亲和层析法分离纯化糖苷酶酶的名称所用的吸附剂?-N-乙酰己糖胺酶Sepharose-ConA(刀豆凝集素)?-甘露糖苷酶?-半乳糖苷酶?-半乳糖苷酶葡萄糖醛酸苷酶Sepharose-?-氨基乙酰甘露糖胺Sepharose-6-氨基乙基-1-硫-?-D-吡喃半乳糖苷聚丙酰胺-对氨基苯基-硫代半乳糖苷琼脂糖-最常用的方法是以合成的对硝基苯酚糖苷化合物作为底物，在酶作用下释放出的对硝基苯酚，在碱性条件下呈黄色，可用分光光度计法定量测定。01把伞形酮类萤光化合物(4-Methyumbelliferone)结合到神经氨酸的半缩醛羟基上，生成