茎尖分生组织培养.pptVIP

隔离种植保存通过无毒原种要在隔离区或隔虫网室内种植保存。植物病毒的传播媒介主要是昆虫如蚜虫、叶蝉离体保存脱毒苗经鉴定后，选择无病原种株系，回接于试管内，可长期保存，是最理想的保存方法。获得无毒原种后，一方面要积极进行无毒苗的推广，另一方面还要做好无病毒种的繁育。1无毒苗的推广应在发展良种的新区使用才能取得良好的效果；在老病区使用时应实行统一的防治措施，一次性全区换种，才能取得应有的效果。2（2）无毒原种的应用无病毒原种的繁殖可在无毒源和其他病虫害的大田中进行，场地土壤要进行消毒，防治蚜虫、线虫和其他传毒媒介，并建立一套严格的原种繁育制度和栽培管理制度，防止病毒的再次感染。第四章????茎尖分生组织培养及脱毒苗生产第一节?茎尖分生组织培养概念和意义概念茎尖分生组织培养：指对不超过0.1mm的茎尖或几十微米的茎尖进行的培养。特点：可获无病毒苗，操作困难，成苗时间长。普通茎尖培养：对几毫米至几十毫米长的茎尖、芽尖及侧芽的培养。操作技术简单、易成活、成苗时间短、繁殖速度快。”茎尖分生组织培养除可以生产脱毒苗外，还具有方法简便，繁殖迅速，遗传性比较稳定，易保持植株的优良性状的优点，在基础理论研究和实际应用中具有重要价值。意义：形态建成研究茎尖分生组织（不带叶原基，250um）用于无病株生产茎尖（带1-3个叶原基，100-1000um）进行营养繁殖芽培养（1mm）育种中的应用与辐射育种结合茎尖分生组织培养一般方法材料的制备健壮枝梢去除叶片分成1-2cm自来水冲洗消毒75%的酒精30秒0.1%升汞或20倍次氯酸钠消毒8-10min无菌水修剪剥离茎尖，通常切割下顶端0.2~0.5mm叶原基的茎尖（无菌水）接种。培养基多为MS培养基及其改良配方，还有White、B5等。培养条件温度：26℃~28℃光照：光培养的效果通常比暗培养好。湿度：与其他器官培养相似。多数栽培植物，尤其无性繁殖植物，都易受到一种或几种，甚至几十种病毒的侵染。例如，草莓感染60多种病毒。并且随着栽培时间的推移，侵染病毒的种类越来越多。受病毒侵染的植物生长缓慢、畸形、产量大幅度下降，品质变劣，甚至完全丧失商品价值。因此说，病毒带来极大的危害。第二节?脱毒苗的培育和病毒检测病毒的危害目前，对细菌和真菌侵染的病害，可以通过药物处理达到治愈的目的，如多菌灵等。但目前，还没有药物能治病毒病。种子一般不带病毒，种子繁殖植物可以得到无菌植株。但对于无性繁殖植物，必须采用一种有效的方法，脱去病毒，才能达到提高产量和质量的目的。病毒侵染的特点早在40年代，就有科学家(White等)发现病毒在根上和茎上的分布是不均匀的，离根尖和茎尖越近，病毒的密度越低。反之，越高。即病毒在植物体内的分布是不均匀的，分生组织一般无病毒侵染。分生组织之所以能避开病毒侵染，可能有4方面原因：01在植物体中，病毒的移动主要靠两条途径，一是通过维管系统，而分生组织中尚未形成维管系统；二是通过胞间连丝，但这条途径病毒移动速度非常缓慢，难以追赶上活跃生长的茎尖和根尖。02在旺盛分裂的分生组织中，代谢活动很高，使病毒无法进行复制。01在茎尖中存在高水平内源激素，可以抑制病毒的增殖。02在植物体内存在有一种“病毒钝化系统”，它在分生组织中的活性应最高，因而使分生组织不受侵染。03以上是四种可能原因，无论哪种说法正确，事实是分生组织一般不带病毒。因此，利用这一原理，进行茎尖培养，培育无病毒苗。植物脱病毒方法茎尖培养微体嫁接愈伤脱毒010203物理方法高温处理化学方法热处理脱毒生物方法珠心培养热处理脱毒法01热处理脱毒原理02病毒DNA分子进入细胞后随植物细胞DNA一起复制。03热处理并不能杀死病毒，只能钝化病毒活性，使病毒在植物体内增殖减缓或增殖停止，失去传染能力。04作为一种物理效应可以加速植物细胞的分裂，使植物细胞在与病毒繁殖的竞争中取胜。05三、脱毒的方法热处理法有：温汤处理（热水浸泡）和热风处理两种。具体方法：热水浸泡处理，适用于切下的材料，在50度左右的温水中浸渍数分钟至数小时，方法简便易行但材料易受伤。热风处理，将生长的盆栽植物移入室内或生长箱内，处理温度因植物种类、生理状况而异。一般为35~40度，短则几十分钟，长达数月。010203040506热处理的优缺点优点:方法简单，效果明显。缺点:具有局限性，不能去除所有病毒。只对圆形病毒（苹果花叶病毒），或对线状病毒（马铃薯卷叶病毒）有效；而对杆状病毒（千日红病毒）无效。热处理后只有小部分植株能够存活。极