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间接荧光法:用一抗与标本中的抗原结合,再用荧光素标记的二抗染色。该法的优点是敏感性比直接法高,制备一种荧光素标记的二抗可用于多种抗原的检测,但非特异性荧光亦会增加。补体结合荧光免疫法:此法是在间接法的第一步抗原—抗体反应时加入补体,使之与抗原——抗体复合物结合;再用荧光素标记的抗C3抗体进行示踪。(RIA)是用放射性核素标记抗原进行的免疫学检测技术。它将放射性核素显示的高灵敏性和抗原抗体反应的特异性结合,使检测的敏感性达pg水平。常用于标记的放射性核素有I125和I131。常用于胰岛素、生长激素、药物等微量物质的测定。放射免疫技术第四节免疫学应用应用免疫学理论阐明疾病的发病机制和发展规律应用免疫学原理和技术诊断和防治疾病重点:常见免疫学防治方法和常见的免疫学检测技术。免疫学防治免疫预防:利用各种生物或非生物制剂来建立机体的免疫应答,以达到预防疾病的目的。用免疫学原理,防病、治病所采取的措施免疫治疗:应用免疫学原理,针对疾病的发生机制,增强机体的免疫功能,以达到治疗目的所采取的措施。特异性免疫类型自然免疫人工免疫自然主动免疫:自然感染自然被动免疫:IgG通过胎盘、初乳SIgA人工自动免疫:接种疫苗、类毒素人工被动免疫:动物免疫血清、胎盘球蛋白等(一)免疫学预防1.人工免疫的概念和种类通过人工的方法使机体获得免疫力,包括人工自动免疫、人工被动免疫。(1)人工自动免疫:是指给机体接种疫苗、类毒素等抗原物质,刺激机体产生特异性免疫应答,以获得免疫力的方法,也称预防接种。主要用于传染病的特异性预防。(2)人工被动免疫:是给人体输入抗体等制剂,使机体获得特异性免疫力。临床多用于治疗和紧急预防。人工自动免疫与人工被动免疫的比较比较类别人工自动免疫人工被动免疫输入物质抗原(疫苗、类毒素)抗体、活化的淋巴细胞、细胞因子等接种次数1-3次1次免疫力出现时间慢(2~3周)快(注射即生效)免疫力维持时间较长,数月~数年较短,2~3周用途多用于预防多用于治疗或紧急预防,调节机体免疫功能,治疗肿瘤死疫苗(灭活疫苗)是选用免疫原性强的病原体,经理化方法使其失去活力制备而成的疫苗。如伤寒、乙型脑炎、霍乱、狂犬病疫苗等。减毒活疫苗是用减毒或无毒力的活病原体制成的疫苗。脊髓灰质病毒、卡介苗、麻疹病毒疫苗是常用的减毒活疫苗。1类毒素:外毒素类毒素24%甲醛32.人工自动免疫常用生物制剂灭活疫苗与减毒疫苗比较种类死疫苗活疫苗制剂特点灭活,毒强株活,弱毒或无毒株接种途径多采取皮下注射多模拟自然感染途径、少数经皮下注射制品类型可多种疫苗混合使用一般单独使用接种量及次数量大,2-3次(7-10天)用量小,1次保存及有效期易保存,稳定,有效期1年不易保存,稳定性差,4℃数周免疫效果较差,维持数月-2年较好,维持3-5年甚至更长时间副作用较大,但无毒力回复突变较小,但有毒力回复突变3.人工被动免疫生物制品抗毒素:外/类毒素→马→Ab人丙种球蛋白:血浆和胎盘丙种球蛋白细胞因子单抗/基因工程抗体人工被动免疫注意事项注意防止超敏反应早期和足量不滥用丙球被动免疫不能激活免疫系统,故不能产生记忆反应,其保护作用是短暂的。温馨提示4.新型疫苗亚单位疫苗:提取有效免疫原成分。如HA、NA,HBSAg合成肽疫苗:人工合成抗原肽。基因工程疫苗编码免疫原基因→载体→体内↓酵母菌、大肠杆菌(体外培养)如:重组抗原疫苗、重组载体疫苗、DNA疫苗、转基因植物疫苗5.计划免疫我国儿童计划免疫程序年龄疫苗年龄疫苗出生时BCG,乙肝疫苗(第1针)6个月乙肝疫苗(第3针)1个月乙肝疫苗(第2针)8个月麻疹疫苗(初种)2个月三价脊灰疫苗(初服)1.5岁三价脊灰疫苗(加服),百白破(加强)3个月三价脊灰疫苗(复服),百白破(第1针)4岁三价脊灰疫苗(加服),麻疹疫苗(复种)4个月三价脊灰疫苗(复服),百白破(第2针)7岁BCG(复种),麻疹疫苗(复种),百白破(加强)5个月百白破(第3针)12岁BCG(农村)接种对象:免疫功能低下、与病原体接触机会多、易感者。接种剂量、次数和间隔时间:死疫苗:2~3次,间隔7~10天。活疫苗接种一次。类毒素接种2次,间隔需4~6周。接种途径:死疫苗:皮下;活疫苗:皮内注射、皮上划痕和自然途径接种,脊髓灰质炎疫苗以口服为佳,流感、腮腺炎疫苗以雾化吸入为好。接种后反应:常于接种
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