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选择性必修三《生物技术与工程》第2章细胞工程第2节动物细胞工程(第三课时)动物体细胞核移植技术和克隆动物工厂化生产
目录课堂小结探究新知04情境导入030201课堂练习一.动物细胞核移植技术二.体细胞核移植的过程三.体细胞核移植技术的应用前景及存在的问题
中国古代的奇思妙想《西游记》中孙悟空“拔一把毫毛望空喷去即变作三二百个小猴”。克隆猴“中中”和“华华”2017年,中国科学家将这一幕变成现实,克隆出两只猕猴“中中”和“华华”。问题:克隆猴的诞生与传统繁殖方式有什么不同?运用什么技术?情境导入——动物体细胞核移植技术
4011.概念:将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中。使这个重新组合的细胞发育成新胚胎,继而发育成动物个体的技术。4.分类:2.原理:3.生殖方式:胚胎细胞核移植:细胞分化程度低,恢复全能性容易体细胞核移植:细胞分化程度高,恢复全能性不容易动物细胞核的全能性无性生殖动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植一、动物细胞核移植技术体细胞或者胚胎细胞克隆动物卵母细胞动物细胞取核去核移入重组细胞发育新胚胎发育克隆动物
5.在体细胞核移植中,非人灵长类动物体细胞核移植非常困难:①供体细胞的细胞核在去核卵母细胞中不能完全恢复其分化前的功能状态,这导致了胚胎发育率低;②另对非人灵长类动物胚胎进行操作的技术尚不完善。我国科学家经过多年努力,攻克了这些障碍,终于成功获得了世界上首例体细胞克隆猴。一、动物细胞核移植技术
①卵母细胞选择②供体细胞的选择和培养③卵母细胞去核④供体细胞注入去核卵母细胞⑤重构胚胎的激活、胚胎移植注入融合⑥分娩获得克隆动物移入二、体细胞核移植的过程
2.一般选用10代以内的细胞,为什么?问702【思考讨论】体积大、营养多、容易操作;营养物质丰富,为发育提供充足营养含有促使细胞核表达全能性的物质②选择高产奶牛(供体)因为10代以内的细胞保证了供体细胞正常的遗传基础。1.为何选用MⅡ卵母细胞?问①采集卵母细胞,体外培养至MⅡ期二、体细胞核移植的过程
801③通过显微操作去核纺锤体——染色体复合物3.卵母细胞去核的原因是什么?问为使核移植动物的核遗传物质全部来自供体的细胞;并防止细胞染色体的数量发生变化二、体细胞核移植的过程原因
901梯度离心、化学物质处理紫外光短时间照射4.观看视频思考:卵母细胞去核的方法是什么?方法:显微操作法二、体细胞核移植的过程卵母细胞去核方法使DNA变性失活,达到去核的目的。没刺破卵母细胞膜,对卵母细胞伤害小。
10④将供体细胞注射入去核的卵母细胞5.将供体细胞整个注入去核卵母细胞中的原因?问对卵母细胞损伤较小;保证供体细胞的细胞核不被破坏,操作方便。二、体细胞核移植的过程
1101⑤通过电融合法使两细胞融合,供体核进入卵母细胞,形成重构胚。重构胚是指人工重新构建的胚胎,具有发育成完成个体的能力。6.什么是重构胚?处理重构胚的目的是什么?问用物理或化学方法(电刺激、Ca2+载体、乙醇和蛋白酶合成抑制剂等)激活重构胚,使其完成细胞分裂和发育进程将胚胎移入受体(代孕)母牛体内克隆犊牛二、体细胞核移植的过程
1201重构胚7.克隆动物是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗?问克隆动物遗传物质细胞核的DNA来自于供体动物的细胞核线粒体中的DNA供体细胞和卵母细胞生活环境:性状可能发生基因突变、染色体变异等可遗传变异出生与供体奶牛遗传物质基本相同的犊牛8.新生牛的性别?与供体相同二、体细胞核移植的过程
01早期胚胎培养动物细胞培养胚胎移植动物细胞融合重构胚早期胚胎通过电融合法使两细胞融合,供体核进入卵母细胞用物理或化学方法激活重构胚,使其完成细胞分裂和发育过程将胚胎移入受体(代孕)母牛体内采集牛卵巢中的卵母细胞,在体外培养到MⅡ期去核的卵母细胞供体细胞培养将供体细胞注入去核的卵母细胞通过显微操作去核高产奶牛(供体)从供体身体的某一部位(如耳)上取体细胞生出与供体奶牛遗传物质基本相同的犊牛9.该过程中应用到了哪些技术?动物细胞核移植动物细胞培养动物细胞融合早期胚胎培养胚胎移植动物体细胞的细胞核具有全能性问10.该技术证明了什么?问二、体细胞核移植的过程
克隆技术:克隆包含分子、细胞、个体3个层次,即分子克隆、细胞克隆、个体克隆。克隆动物:用核移植的方法得到的动物克隆是指通过无性生殖而产生的遗传上均一的生物群,即具有完全相同的遗传组成的一群细胞或者生物的个体。分子克隆:单克隆抗体技术、PCR技术(一般指DNA分子扩增)细胞克隆:动物细胞、植物细胞培养技术(由一个细胞分裂所形、成的细胞群体)个体克隆:植物组织培养技术、核移植技术(指基因型完全相同的个体或、群体)为何不称为“克隆技术”而是“核移植技术”?二、体细胞核移植的过程
体细胞核
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