脓汁和粪便标本中病原菌的检测.pptVIP

*器材准备半固体培养物4支，药敏试验培养物4个，微量发酵管培养物1套,玻片4个。脓汁和粪便标本中病原菌的检测（六）药敏实验结果分析糖发酵、动力实验结果分析玻片凝集试验高压蒸汽灭菌细菌综合性实验总结实验报告撰写细菌感染的检查方法和防治原则（录像）洗刷药敏试验结果用尺子量抑菌圈直径（单位毫米）抗菌药物纸片含药量抑菌圈直径(mm)1耐药中度敏感敏感2青霉素G(葡萄球菌)10单位≤28-≥293链霉素10微克≤1112～14≥154庆大霉素10微克≤1213～14≥155四环素30微克≤1415～18≥196氯霉素30微克≤1213～17≥187磺胺300微克≤1213～16≥178常用药敏试验纸片判断标准P21药敏实验结果分析青霉素链霉素庆大霉素黄色细菌白色细菌紫黑细菌粉红细菌注：耐药－，中度敏感±，敏感＋。01G+球菌对青霉素和链霉素敏感。G-杆菌对青霉素耐药，对链霉素敏感。G+球菌和G-杆菌对广谱抗菌素庆大霉素都敏感。0203抗菌素药敏试验纸片法结果糖发酵、动力试验结果判断反应现象结果描述符号培养基变色无气泡分解×糖产酸不产气＋培养基变色有气泡分解×糖产酸又产气⊕培养基不变色不分解×糖－细菌扩散生长,培基混浊细菌有鞭毛＋沿接种线生长,培基清澈透明细菌无鞭毛－糖发酵试验结果平皿水平放置，观察结果半固体穿刺培养结果对光上下移动至合适观察位置，观察结果。肠道杆菌科各菌属生化反应鉴别表葡萄糖乳糖麦芽糖甘露醇蔗糖半固体埃希菌属⊕⊕⊕⊕√+志贺菌属+√√+/--/+-沙门菌属⊕/+-⊕⊕-+霍乱弧菌+-++++变形杆菌属⊕-√-√+注：+产酸或阳性，⊕产酸产气，-阴性，+/-多数阳性，-/+多数阴性√不确定。玻片凝集试验SlideAgglutinationTest在适量电解质存在的情况下，颗粒性抗原(细菌)与特异性抗体混合，如果比例合适，则出现肉眼可见的凝集块，称为凝集反应。取洁净的载玻片一张，将玻片磨面近端设为对照区，滴加生理盐水15ul。远端设为试验区，滴加福氏志贺菌诊断血清15ul，用接种环分别取粉红色菌苔，约2个小菌落的菌量，研磨于盐水或血清内，混合均匀。※载玻片反复倾侧，让菌液充分混匀，凝集速度更快、结果更清楚。※菌液凝集者记为阳性，菌液均匀混浊记为阴性。玻片凝集结果判定玻片来回倾侧数次，肉眼观察；2～3分钟内仍不出现凝集者,可认为阴性(－)。……;菌液混浊，少量絮状,25%凝集,阳性(＋)。……;菌液轻度混浊,絮状凝集块较小,阳性(＋＋)。……;菌液澄清,有明显絮片,75%凝集,阳性(＋＋＋)。010203纯培养时，菌落挑错了。无菌操作不严格，污染杂菌。接种时未协调好，接种错误。实验结果错误的分析生物安全警告本次实验操作，可产生几十个微生物气溶胶颗粒。01气溶胶粒径＞100um沉降很快,＜50um在0.4s内扩散开,＜5um通过呼吸道直接到达肺泡。02Pike博士对实验室感染统计分析结果发现，不明原因的感染高达82%，大多数是气溶胶在空气中扩散引起的。03实验时应坐着，在火焰周围10～20厘米内操作，保持安静、有序，尽量少说话、少走动，以免感染病原菌。04灭菌药敏试验平板、动力试验半固体琼脂、微量糖发酵管→高压蒸汽灭菌!器材收摊入柜前，接种环，接种针必须再次烧灼灭菌！实验总结采用平板划线分离法，从浓汁标本中分离出黄色和白色两种菌落。显微镜下，这两株细菌均为G+球菌，排列不规则，呈葡萄串状，是典型的葡萄球菌；结合菌落颜色，这两株葡萄球菌分别是金黄色葡萄球菌和白色葡萄球菌。通过血浆凝固酶试验鉴别，金黄色葡萄球菌是致病菌。采用伊红美蓝平板，从