3.2 基因工程的基本操作程序课件高二下学期生物人教版选择性必修3.pptx

第2节基因工程的基本操作程序第3章基因工程本节聚焦：1、基因工程的基本操作程序主要包括哪几个步骤？2、基因工程操作的每一步涉及的技术和方法有哪些？

从社会中来从苏云金杆菌内获得Bt抗虫蛋白基因与载体结合转入棉花细胞检查转基因抗虫棉是否培育成功基因表达载体的构建（核心）将目的基因导入受体细胞目的基因的检测与鉴定目的基因的筛选与获取我国科学家将从苏云金芽孢杆菌基因中剪切出BT毒蛋白基因与农杆菌的Ti质粒（环状DNA分子）进行拼接导入到棉花细胞中，并培养出产生BT毒蛋白的抗虫棉花植株。减少农药用量40万吨，增收节支社会经济效益450亿元。基因工程培育抗虫棉的基本步骤是什么？

基因工程基本操作程序：1、目的基因的筛选与获取2、基因表达载体的构建3、将目的基因导入受体细胞4、目的基因的检测与鉴定

一、目的基因的筛选与获取1.目的基因概念：例如：在基因工程的设计和操作中，用于改变或获得等的基因。主要指的是。与生物抗逆性、优良品质、生产药物、毒物降解和工业用酶等相关的基因。受体细胞性状预期表达产物Bt抗虫蛋白基因（Bt基因）编码蛋白质的基因如何筛选目的基因？

Bt抗虫蛋白只有在某类昆虫肠道的碱性环境中才能表现出毒性，而人和牲畜的胃液呈酸性，肠道细胞也没有特异性受体。例：Bt抗虫蛋白基因的筛选苏云金杆菌（Bt）制成的生物杀虫剂广泛用于防治棉花虫害对Bt基因的表达产物-Bt抗虫蛋白有较为深入的了解：杀虫作用与Bt基因有关掌握了Bt基因的序列信息Bt基因是培育转基因抗虫棉较为合适的目的基因一、目的基因的筛选与获取当Bt抗虫蛋白被分解为多肽后，多肽与害虫肠上皮细胞的特异性受体结合，导致细胞膜穿孔，最后造成害虫死亡。思考：Bt抗虫蛋白会不会对人畜产生危害？2.筛选合适的目的基因：从相关的________和_________的基因中进行筛选已知结构功能清晰

一、目的基因的筛选与获取2.筛选合适的目的基因：从相关的________和_________的基因中进行筛选已知结构功能清晰随着测序技术的发展，以及序列数据库、序列比对工具等的应用，越来越多的基因的结构和功能为人们所知，为找到合适的目的基因提供了更多的机会和可能明确了目的基因后，该怎么获取它呢？人工合成PCR扩增常用方法我国首批转基因抗虫棉的培育使用

PCR是_______________的缩写，是一项根据______________的原理，在____提供参与DNA复制的_______与_________，对____________________进行________的技术；3.利用PCR获取和扩增目的基因（1）PCR的概念:聚合酶链式反应DNA半保留复制体外各种组分反应条件目的基因的核苷酸序列大量复制①全称：②原理：③操作环境：④目的：⑤优点：聚合酶链式反应DNA半保留复制体外（PCR扩增仪/PCR仪）对目的基因的核苷酸序列进行大量复制可以在短时间内大量扩增目的基因一、目的基因的筛选与获取

DNA的复制视频讲解

（2）DNA复制所需的基本条件:参与的组分在DNA复制中的作用解旋酶DNA母链4种脱氧核苷酸DNA聚合酶引物提供DNA复制的模板合成DNA子链的原料打开DNA双链催化合成DNA子链使DNA聚合酶能够从引物的3’端开始连接脱氧核苷酸模板、原料、能量、酶、引物（体外用高温）

2、需要_____种引物，原因是_________________________________________________________________________________引物是一小段能与________的一段碱基序列________的____________DNA母链互补配对短单链核酸3’5’DNA母链3’5’DNA母链3’5’引物3’5’引物引物1、DNA复制为什么需要引物？DNA聚合酶不能从头合成DNA，只能从引物的3′端开始延伸DNA子链。2DNA的两条链反向平行，都做模板，用2种引物才能保证DNA的两条链同时被复制3、体外DNA复制，设计引物要依据什么？有什么要求？根据一段已知的目的基因序列合成引物要求：①引物自身不能发生碱基互补配对②2种引物之间不能发生碱基互补配对防止引物自身折叠或引物之间配对，导致引物不能与模板链结合

阅读课本77页—79页，思考：3min1.PCR需要哪些条件？2.PCR过程是怎样的？3.PCR与体内DNA复制相同点和区别是什么？3.利用PCR获取和扩增目的基因

PCR视频

1.PCR需