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血液学检验技术90课件.ppt

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职业教育医学检验技术专业教学资源库特异性酯酶(氯乙酸AS-D萘酚酯酶)非特异性酯酶pH值不同酸性酯酶(酸性α-醋酸萘酚酯酶)碱性酯酶(α-丁酸萘酚酯酶)中性酯酶α-醋酸萘酚酯酶醋酸AS-D萘酚酯酶酯酶染色酯酶特异性酯酶染色氯乙酸AS-D萘酚酯酶(NAS-DCE)染色特性:特异性高,几乎只出现在粒细胞中,又称“特异性酯酶”、“粒细胞酯酶”作用:该酶可特异性识别粒细胞系,有助于急粒与急单的鉴别,特别是对POX反应较弱单核细胞白血病有重要的诊断意义酯酶染色氯乙酸AS-D萘酚酯酶(NAS-DCE)染色原理氯乙酸AS-D萘酚H2O细胞内NAS-DCE萘酚AS-D重氮盐(坚牢紫酱GBC)生成不溶性红色沉淀定位于胞质中酯酶染色正常染色反应(粒细胞系)早期原粒(-)晚期原粒(+)自早幼粒中性成熟粒(+)(但活性并不随着细胞成熟而增强)嗜酸性粒细胞阴性或弱阳性嗜碱性粒细胞阳性酯酶染色绝大多数为阴性正常染色反应(单核系其他各系)单核细胞系其他各系有核红细胞(-)肥大细胞(+)淋巴细胞(-)巨核细胞(-)浆细胞(-)组织细胞(-)酯酶染色染色结果观察原始粒细胞弱阳性幼稚粒细胞强阳性中性杆状核粒细胞强阳性酯酶染色急粒:阳性急单:阴性急淋:阴性慢粒急变时:酶活性增强急性白血病的常规细胞化学染色临床意义主要鉴别用于急性白血病的类型α-醋酸萘酚酯酶染色(α-NAE)特征:是一种中性非特异性酯酶,存在于单核细胞、粒细胞和淋巴细胞中。单核系细胞的阳性可被氟化钠抑制,所以做α-NAE染色时,常同时做氟化钠抑制试验。作用:α-NAE染色+氟化钠抑制试验,对鉴别单核细胞白血病由重要价值。酯酶染色α-醋酸萘酚酯酶染色(α-NAE)染色原理α-醋酸萘酚H2O细胞内α-NAEα-萘酚重氮盐(坚牢蓝B)生成不溶性棕黑色或灰黑色沉淀定位于胞质中醋酸作用液+氟化钠单核细胞被抑制其他系不被抑制酯酶染色酯酶染色晚期原单强阳性幼单成熟单核(+)(阳性反应能被氟化钠抑制)(氟化钠抑制试验抑制率﹥50%)正常染色反应(单核系)氟化钠抑制率=抑制前阳性率或阳性积分抑制前阳性率或阳性积分﹣抑制后阳性率或阳性积分×100%酯酶染色正常染色反应(粒系及其他各系)粒系淋巴系巨核系红系多成阴性少数弱阳性多成阴性T淋巴阳性巨核、血小板阳性少数有核红细胞呈弱阳性阴性浆细胞系阳性结果不被氟化钠抑制酯酶染色α-NAE+氟化钠抑制试验,对鉴别单核细胞白血病有重要价值。有时单核系细胞或粒细胞阳性较弱,其结果只能作为参考指标。本实验存在假阳性和假阴性现象临床意义用于鉴别用于急性白血病的类型酯酶染色临床应用及考核酯酶染色M5型,同一种标本片α-NAE氟化钠抑制染色原始、幼稚单核细胞阳性反应被氟化钠抑制α-NAE染色原始、幼稚单核细胞多呈强阳性酯酶染色α-NAE染色部分细胞呈强阳性M4型,同一种标本片α-NAE氟化钠抑制染色被氟化钠抑制α-丁酸酸萘酚酯酶染色(α-NBE)特征:此酶在单核-吞噬细胞系统中活性最强,能被氟化钠抑制,而粒系、淋巴系、部分幼红细胞、巨核细胞和血小板等含量很少,被视为单核-吞噬细胞系统所特有的标志酶。作用:α-NBE再结合细胞形态和其他细胞化学染色,可为急性非淋巴细胞白血病的分型提供重要依据。酯酶染色酯酶染色α-丁酸萘酚酯酶染色(α-NBE)染色原理α-丁酸萘酚H2O细胞内α-NBEα-萘酚重氮盐(坚牢紫酱 GBC)生成不溶性红色沉淀定位于胞质中丁酸作用液+氟化钠单核细胞被抑制其他系不被抑制酯酶染色临床应用同α-NAE,敏感性比α-NAE低,但特异性强临床意义用于鉴别急非淋白血病的类型将POX染色与α-NBE染色+氟化钠抑制联合使用,对AML-M2、M4、M5分型更有价值原始粒细胞呈阳性或阴性,故阴性也不能排除急粒,NAS-DCE为粒细胞特异性酯酶,但早期粒细胞该酶反应不如POX敏感,因此AML-M1的典型细胞化学反应模式常为POX(+)、NAS-DCE(—)原始粒细胞呈阳性或阴性,故阴性也不能排除急粒,NAS-DCE为粒细胞特异性酯酶,但早期粒细胞该酶反应不如POX敏感,因此AML-M1的典型细胞化学反应模式常为POX(+)、NAS-DCE(—)**

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