自由基损伤学说及抗氧化剂.pptVIP

常见自由基的

理化性质常见自由基活性氧（ReactiveOxygenSpecies,ROS）活性氮（ReactiveNitrogenSpecies，RNS）以碳、氧、氮或硫原子为中心的自由基活性氧（ROS）O2·-H2O2OH·SODCatNO.+O2·-→ONOO-活性氮（RNS）过氧亚硝基阴离子超氧阴离子(O2·-)化学性质：O2·-在细胞内可直接导致DNA损伤，并可使过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶和肌酸激酶失活，其细胞毒性作用主要通过衍生产生H2O2和OH·。清除：细胞内有SOD起清除作用。过氧化氢(H2O2)“长效”“稳定”清除：H2O2在体内可经过氧化氢酶作用降解为水和氧气。化学性质：H2O2的性质较稳定，半衰期最长，可以穿透大部分细胞膜，因而可以发挥重要的信使功能，但这一特性也增加了其细胞毒作用。羟自由基(OH·)“寿命短”“稳定差”化学性质：OH·是已知活性最强的氧化剂，化学性质极为活泼，几乎可以与所有细胞成分发生反应，对机体危害极大。但是由于其作用范围小，仅能与它的邻近的分子反应。清除：主要通过抗坏血酸、GSH（或其他的硫醇）、褪黑色素、NADPH等活性物质及细胞色素P450体系降解和清除。过氧亚硝基阴离子（ONOO-）化学性质：ONOO-作为一种强氧化剂，可以介导蛋白巯基和非蛋白巯基的氧化，并可氧化细胞膜脂、蛋白及DNA，导致细胞损伤和疾病的发生或介导信号转导。降解：在碱性条件下，ONOO-比较稳定。一旦质子化，立即分解产生类羟基和NO2自由基。机体对自由基的防御氧化应激与心血管疾病在生理情况下活性氧可维持在极低水平，参与机体生长发育的调控，信号转导、诱导增殖与分化、诱导凋亡，调节运动等多种生理过程，在生物体内发挥着重要的功能。生成增加，消除减少机体损伤动脉粥样硬化是动脉硬化性血管病中最常见的一种。动脉内膜积聚的脂质外观呈黄色粥样。引起管壁增厚变硬、失去弹性和管腔缩小。*氧化应激与动脉粥样硬化ATVB.2005;25:29-38.NADPH氧化酶与动脉粥样硬化01AT1ReceptorAntagnoistAngII02NADPHOxidaseAcitvityThrombin03O2.-TNF-α04Lackofp47phoxAT1ReceptorPDGF氧化应激与高血压自由基的信号转导途径氧自由基参与信号转导通路TranscriptionFactorProteinKinaseCIsoformsCytoplasmicProteinKinasesProteinTyrosinePhosphatasesCytosolicCa2+ConcentrationsMAPKCascadesInsulinReceptorKinaseActivityEGFReceptorRoleofROSinEGFReceptor-MediatedSignalling?MAPK信号级联反应StimulusGrowthfactors,Mitogen,GPCRp38MAPKStress,GPCR,Inflammatorycytokines,GrowthfactorsStress,Growthfactors,Mitogen,GPCRMEKK1,4,MLK3,ASK1MEKK2,3,Tpl2MLK3,TAK,DLKRaf,Mos,Tpl2MKK3/6MEK1/2MKK4/7MEK5ERK1/2MAPKKKGrowth,Differentiation,DevelopmentInflammation,Apoptosis,Growth,DifferentiationGrowth,Differentiation,DevelopmentERK5/BMK1JNK1,2,3MAPKKMAPKBiologicalresponses自由基的检测化学发光法检测原理：活性氧、氧自由基与发光增效剂反应，释放能量，产生化学发光。检测对象：超氧阴离子、羟自由基、H2O2和脂质过氧化产生的自由基都可以产生化学发光。优点：灵敏、快速、操作简单、价格低廉。缺点：非特异性。另外，几乎所有的氧化剂，如次氯酸、高锰酸钾等都可以与发光增效剂反应，产生化学发光，严重干扰活性氧的检测。Fe2+也可以产生非常强的化学发光。二氢乙啶(Dihydroeth