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人人好公，则天下太平；人人营私，则天下大乱。——刘鹗
医学硕士研究生开题报告范文
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一、立题依据(科学意义及国内外现状分析及参考文献)
恶性黑色素瘤是一种高度恶性且最具侵袭性的癌之一，
多发生于皮肤，早期发生血行转移。对放、化疗不敏感，在
世界范围内发病率增高，人们一直在期待着可以征服恶性黑
素瘤的新的疗法的出现!
最近大量的数据表明恶性肿瘤的发展与T-钙粘蛋白的
表达变化相关.T-钙粘蛋白已在乳腺癌、前列腺癌、肝癌、
肺癌[1-3]、胃癌、胰腺癌、卵巢癌[4-9]等多种恶性肿瘤
中被检测到表达减少.最近的研究表明T/H—钙粘蛋白在乳
腺癌中的重新表达能抑制肿瘤细胞的生长,降低体外培养的
肿瘤细胞的侵袭潜能[1].T/H—钙粘蛋白这个新型钙粘蛋白
分子在人类许多癌细胞中表达都降低表明它或许在肿瘤细
胞的侵袭和转移[10]及维持正常细胞的表型中起重要作用
[11].
T/H—钙粘蛋白与肿瘤的发生、发展有着密切的联系,也
许它会为肿瘤的诊断和治疗带来新的契机.
T-钙粘蛋白是否对恶性黑色素瘤也有作用，目前还没有
相关研究的报道，所以本实验将进行相关方面的探讨性研究!
二、研究内容及预期成果(说明具体研究内容、创新点
古之立大事者，不惟有超世之才，亦必有坚忍不拔之志。——苏轼
及拟解决的关键问题、预期成果及提供形式)
研究内容：
第一部分：正常表皮组织、痣细胞及黑色素瘤细胞中
T-cadherin表达情况
第二部分T-cadherin基因克隆和真核表达载体的构建
第三部分：T-cadherin基因的真核表达及生物活性分析
创新点：首次将T-cadherin基因转染黑素瘤细胞
拟解决的关键问题：通过RT-PCR反应扩增出T-cadherin
的基因全长。
预期成果及提供形式：
观察T-钙粘蛋白在正常皮肤组织细胞、痣细胞及黑色素
瘤细胞中的表达情况!
进一步阐明T-钙粘蛋白作用机制
T-钙粘蛋白基因转染入黑色素瘤细胞后观察对其增殖
和转移活性的抑制情况，探索临床诊断和治疗黑色素瘤及其
它肿瘤的方法!
三、研究方案(包括研究方法、技术路线、研究进度安
排)
研究方法：
第一部分：正常表皮组织、痣细胞及黑色素瘤细胞中
T-cadherin表达情况
免疫组织化学和免疫细胞化学
饭疏食，饮水，曲肱而枕之，乐亦在其中矣。不义而富且贵，于我如浮云。——《论语》
1.材料：从正常人皮肤切取的痣组织，人黑色素瘤细胞
株
2.主要试剂和溶液
(1)第一抗体：兔抗人T-cadherin抗体
(2)第二抗体：生物素标记羊抗兔IgG
(3)“三抗”：链亲和霉素标记HRP
3.设备
4.方法
(1)冷冻切片的免疫染色程序
(2)活细胞的免疫染色程序
5.荧光显微镜检
注意：为保证结果的可靠性应该同时设有对照
阳性对照(正常组织);
阴性对照(PBS代替一抗)
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