疫自动化仪器分析.pptVIP

ECLIA检测流程图五（撤消磁场冲洗磁珠）化学发光自动免疫分析化学发光免疫分析是免疫技术、发光技术和计算机系统的结合，具有特异性强、灵敏度高（pg/ml)、精密度好、准确度好等特点，越来越多的人体微量指标应用这种方法来检测，已渐渐代替了RIA。免疫比浊分析技术化学发光、电发光分析技术荧光免疫分析技术放射免疫分析技术酶免疫分析技术流式细胞术自动化免疫仪器种类（应用技术）010204由免疫反应、荧光及计算机技术联合应用的技术主要有时间分辨荧光免疫测定和荧光偏振免疫测定利用荧光物质标记抗原抗体的一种检测方法荧光免疫自动化时间分辨荧光免疫测定（TRFIA）：AG-AB结合，某些荧光物质发长寿命荧光，时间分辨技术利用长寿命荧光物质（镧氏元素铕螯合物）标记抗原或抗体，测定过程中，可利用延迟时间来消除非特异性的荧光干扰（图）。荧光免疫自动化光强度激发短寿命荧光长寿命荧光铕螯合物的激发、发射光谱延迟时间测量时间TRFIA设计中的一些注意事项：Stakes位移（图）解离增强荧光免疫自动化21荧光偏振免疫测定：以小分子物质与大分子物质的旋转差异而使它们对偏振光的吸收不同为依据检测小分子药物荧光酶免疫分析：标记酶参与反应荧光免疫自动化波长300400500600700Stakes吸光度Stakes位移示意图激发光荧光免疫比浊分析技术01化学发光、电发光分析技术02荧光免疫分析技术03放射免疫分析技术04酶免疫分析技术05流式细胞术06自动化免疫仪器种类（应用技术）流式细胞仪（FCM）是以激光为光源，检测生物学颗粒理化性质的仪器1生物学颗粒包括免疫复合物、DNA、RNA、蛋白质、病毒颗粒、脂质体、细胞器、细胞、染色体、真核细胞等2理化性质则为细胞大小、形状、胞浆颗粒、DNA含量、酶活性等3流式细胞仪FCM综合了激光技术、电子技术、流体力学、细胞化学及计算机技术，被称为实验室“CT”1FCM现正广泛应用于细胞生物学、免疫学、肿瘤学、血液学、病理学、遗传学、临床检验学等2流式细胞仪免疫自动化仪器分析上世纪50年代末60年代初，利用AG-AB复合物形成使浊度改变，再用比浊计来比浊，但因其敏感性差未被接受70年代初，开始有自动检测系统，但因其用的是激光为光源，固定波长，灵敏度较低，而且时间一般要2—3小时早期免疫分析通过观察沉淀物形成，凝集及溶血现象发生来分析，如免疫扩散、免疫电泳、血凝试验、补体结合等概论70年代未，速率比浊计的出现，使抗原抗体结合的反应在几十秒内出结果，可以说是免疫化学测定的革命的发展01随着标记技术的发展，免疫化学可以纳入临床化学检验范畴02如今，自动化免疫分析系统更加飞速发展03自动化免疫分析的基础是抗原抗体的结合，具有高特异性；手段多是利用标记技术而将检测信号放大，具有高灵敏度04概论自动化免疫仪器种类（应用技术）免疫比浊分析技术化学发光、电发光分析技术荧光免疫分析技术放射免疫分析技术酶免疫分析技术流式细胞术利用抗原抗体结合后溶液的浊度变化而检测的一种方法此法准确快速，已成为免疫诊断技术中重要的检测手段比浊法与比色法免疫比浊基本原理：抗原抗体复合物对一定波长的光产生折射、偏转，偏转角度及散射光强度与复合物粒子的大小和量有关（图）Rayleigh散射（图）Mile散射Heidelberger曲线散射免疫比浊分析法基本原理：免疫沉淀反应和散射比浊分析结合之技术，反应分两个阶段，预反应阶段和反应阶段（图）1保证抗原不过量的方法：确保反应体系抗体过量对抗原过量进行阈值限定2定时散射比浊分析预反应阶段5ul样本01抗原过剩区02阈值03信号04反应阶段45ul样本055秒062分钟076分钟（2+4分钟）08抗原不过量抗原过量09定时散射比浊反应曲线图速率散射比浊分析01基本原理：抗原抗体结合反应的一种动态测定法，适时检测抗原抗体复合物形成的散射光信号最快反应时间（图）抗原过量检测（图）02峰值信号与抗原抗体反应之间的关系图散射光峰值CHIBAD抗原浓度递增F单击此处输入你的正文G反应时间（秒）06085散射率抗体过量抗原过量第二峰值信号抗原量检测速率峰值信号产生基本原理：检测信号是通过溶液的光，测量角度与正前方夹角为0℃（图），保持抗体过量，形成可溶性AG-AB复合物，使介质浊度发生改变。01实验要求：选择亲和力高的抗体，抗原抗